中华创伤骨科杂志
中華創傷骨科雜誌
중화창상골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDIC TRAUMA
2008年
2期
164-168
,共5页
梁伟国%沈雁%关广雄%杨小红%戴丽冰%梁佩红%谭见容%李超霞
樑偉國%瀋雁%關廣雄%楊小紅%戴麗冰%樑珮紅%譚見容%李超霞
량위국%침안%관엄웅%양소홍%대려빙%량패홍%담견용%리초하
软骨细胞%细胞,培养的%载体%正交试验
軟骨細胞%細胞,培養的%載體%正交試驗
연골세포%세포,배양적%재체%정교시험
目的 通过正交试验设计研究四种主要因素对软骨细胞增殖的影响,探讨海藻酸钠胶体复合载体体外培养软骨细胞增殖的最佳配比培养体系,为组织工程种子细胞的研究提供实验依据. 方法 建立单层贴壁和海藻酸钠复合载体立体培养细胞模型,采用正交试验4因素2-way和4因素3-way设计,用XTT方法检测软骨细胞在一定浓度的复合因子包括碱性成纤维细胞生长因子、透明质酸钠、纤维连接蛋白、壳聚糖的完全培养基中的增殖情况;采用倒置、相差、激光共聚焦显微镜的形态学观察;采用LDH检测复合材料对细胞的毒性反应,确定体外培养体系方案. 结果 正交试验设计能确定各因素的有效浓度及配比方案,其中碱性成纤维细胞生长因子与透明质酸有共协同作用,在DMEM/Ham's F12复合培养基的海藻酸钠载体支架中培养软骨细胞能快速增殖,细胞数48 h就增殖3倍多,Safranine O GAG染色显示传至9代仍然产生大量蛋白聚糖基质;LDH检测未见毒副作用;该复合载体具有良好的成形性和组织相容性. 结论 在DMEM/Ham's F12复合培养基的海藻酸钠载体中培养能快速增殖并有利于维持软骨细胞表型及功能的表达.
目的 通過正交試驗設計研究四種主要因素對軟骨細胞增殖的影響,探討海藻痠鈉膠體複閤載體體外培養軟骨細胞增殖的最佳配比培養體繫,為組織工程種子細胞的研究提供實驗依據. 方法 建立單層貼壁和海藻痠鈉複閤載體立體培養細胞模型,採用正交試驗4因素2-way和4因素3-way設計,用XTT方法檢測軟骨細胞在一定濃度的複閤因子包括堿性成纖維細胞生長因子、透明質痠鈉、纖維連接蛋白、殼聚糖的完全培養基中的增殖情況;採用倒置、相差、激光共聚焦顯微鏡的形態學觀察;採用LDH檢測複閤材料對細胞的毒性反應,確定體外培養體繫方案. 結果 正交試驗設計能確定各因素的有效濃度及配比方案,其中堿性成纖維細胞生長因子與透明質痠有共協同作用,在DMEM/Ham's F12複閤培養基的海藻痠鈉載體支架中培養軟骨細胞能快速增殖,細胞數48 h就增殖3倍多,Safranine O GAG染色顯示傳至9代仍然產生大量蛋白聚糖基質;LDH檢測未見毒副作用;該複閤載體具有良好的成形性和組織相容性. 結論 在DMEM/Ham's F12複閤培養基的海藻痠鈉載體中培養能快速增殖併有利于維持軟骨細胞錶型及功能的錶達.
목적 통과정교시험설계연구사충주요인소대연골세포증식적영향,탐토해조산납효체복합재체체외배양연골세포증식적최가배비배양체계,위조직공정충자세포적연구제공실험의거. 방법 건립단층첩벽화해조산납복합재체입체배양세포모형,채용정교시험4인소2-way화4인소3-way설계,용XTT방법검측연골세포재일정농도적복합인자포괄감성성섬유세포생장인자、투명질산납、섬유련접단백、각취당적완전배양기중적증식정황;채용도치、상차、격광공취초현미경적형태학관찰;채용LDH검측복합재료대세포적독성반응,학정체외배양체계방안. 결과 정교시험설계능학정각인소적유효농도급배비방안,기중감성성섬유세포생장인자여투명질산유공협동작용,재DMEM/Ham's F12복합배양기적해조산납재체지가중배양연골세포능쾌속증식,세포수48 h취증식3배다,Safranine O GAG염색현시전지9대잉연산생대량단백취당기질;LDH검측미견독부작용;해복합재체구유량호적성형성화조직상용성. 결론 재DMEM/Ham's F12복합배양기적해조산납재체중배양능쾌속증식병유리우유지연골세포표형급공능적표체.
