中华眼科杂志
中華眼科雜誌
중화안과잡지
Chinese Journal of Ophthalmology
2008年
5期
413-417
,共5页
郑康铿%余敏斌%江儒章%李庆南
鄭康鏗%餘敏斌%江儒章%李慶南
정강갱%여민빈%강유장%리경남
噻唑烷二酮类%成纤维细胞%细胞增殖%转化生长因子β
噻唑烷二酮類%成纖維細胞%細胞增殖%轉化生長因子β
새서완이동류%성섬유세포%세포증식%전화생장인자β
Thiazolidinediones%Fibroblasts%Cell proliferation%Transforming growth factor beta
目的 观察罗格列酮对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞(HTFs)增殖及转化生长因子β1(TGF-β1)分泌的影响.方法 对照实验研究.体外培养HTFs,分别采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色(MTT)法及划线法,对培养细胞分别加入10、20、50、100、250、300、400及500 ms/L的罗格列酮,研究不同浓度的罗格列酮对体外培养的HTFs增殖及移行的影响,同时采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测不同浓度的罗格列酮对细胞TGF-β1分泌量的影响,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,研究不同浓度罗格列酮对TGF-β1 mRNA表达的影响.不同浓度罗格列酮对HTFs增殖活力、TGF-β1分泌及TGF-β1 mRNA合成的影响,采用单因素方差分析(ANOVA);不同浓度罗格列酬对细胞移行数量的影响,采用单因素多水平设计定量资料的方差分析;相邻药物浓度组间吸光度(A)值和细胞移行数量比较,采用q检验.结果 当罗格列酮浓度为20 ms/L时,MTT法测定的A值为0.29±0.02,ELISA法测定的A值为267.48±20.31,RT-PCR测定的A值为0.55±0.02,与对照组(MTT法测定的A值为0.33±0.01,ELISA法测定的A值为323.48±13.69,RT-PCR法测定的A值为0.69±O.02)相比,能明显抑制HTFs的增殖和移行,并明显下调TGF-β1的分泌和TGF-β1mRNA的表达,差异有统计学意义(F=178.293,86.404,176.102;P＜0.01);随着罗格列酮浓度的增高,抑制作用相应增强,相邻药物浓度间A值差异均有统计学意义(q值介于3.00～10.36之间,P＜0.05).结论 罗格列酮能明显抑制HTFs增殖和移行,其作用与其抑制TGF-β1的分泌有关.
目的 觀察囉格列酮對體外培養的人眼毬觔膜囊成纖維細胞(HTFs)增殖及轉化生長因子β1(TGF-β1)分泌的影響.方法 對照實驗研究.體外培養HTFs,分彆採用四甲基偶氮唑藍微量酶反應比色(MTT)法及劃線法,對培養細胞分彆加入10、20、50、100、250、300、400及500 ms/L的囉格列酮,研究不同濃度的囉格列酮對體外培養的HTFs增殖及移行的影響,同時採用酶聯免疫吸附測定(ELISA)檢測不同濃度的囉格列酮對細胞TGF-β1分泌量的影響,採用半定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法,研究不同濃度囉格列酮對TGF-β1 mRNA錶達的影響.不同濃度囉格列酮對HTFs增殖活力、TGF-β1分泌及TGF-β1 mRNA閤成的影響,採用單因素方差分析(ANOVA);不同濃度囉格列酬對細胞移行數量的影響,採用單因素多水平設計定量資料的方差分析;相鄰藥物濃度組間吸光度(A)值和細胞移行數量比較,採用q檢驗.結果 噹囉格列酮濃度為20 ms/L時,MTT法測定的A值為0.29±0.02,ELISA法測定的A值為267.48±20.31,RT-PCR測定的A值為0.55±0.02,與對照組(MTT法測定的A值為0.33±0.01,ELISA法測定的A值為323.48±13.69,RT-PCR法測定的A值為0.69±O.02)相比,能明顯抑製HTFs的增殖和移行,併明顯下調TGF-β1的分泌和TGF-β1mRNA的錶達,差異有統計學意義(F=178.293,86.404,176.102;P＜0.01);隨著囉格列酮濃度的增高,抑製作用相應增彊,相鄰藥物濃度間A值差異均有統計學意義(q值介于3.00～10.36之間,P＜0.05).結論 囉格列酮能明顯抑製HTFs增殖和移行,其作用與其抑製TGF-β1的分泌有關.
목적 관찰라격렬동대체외배양적인안구근막낭성섬유세포(HTFs)증식급전화생장인자β1(TGF-β1)분비적영향.방법 대조실험연구.체외배양HTFs,분별채용사갑기우담서람미량매반응비색(MTT)법급화선법,대배양세포분별가입10、20、50、100、250、300、400급500 ms/L적라격렬동,연구불동농도적라격렬동대체외배양적HTFs증식급이행적영향,동시채용매련면역흡부측정(ELISA)검측불동농도적라격렬동대세포TGF-β1분비량적영향,채용반정량역전록취합매련반응(RT-PCR)법,연구불동농도라격렬동대TGF-β1 mRNA표체적영향.불동농도라격렬동대HTFs증식활력、TGF-β1분비급TGF-β1 mRNA합성적영향,채용단인소방차분석(ANOVA);불동농도라격렬수대세포이행수량적영향,채용단인소다수평설계정량자료적방차분석;상린약물농도조간흡광도(A)치화세포이행수량비교,채용q검험.결과 당라격렬동농도위20 ms/L시,MTT법측정적A치위0.29±0.02,ELISA법측정적A치위267.48±20.31,RT-PCR측정적A치위0.55±0.02,여대조조(MTT법측정적A치위0.33±0.01,ELISA법측정적A치위323.48±13.69,RT-PCR법측정적A치위0.69±O.02)상비,능명현억제HTFs적증식화이행,병명현하조TGF-β1적분비화TGF-β1mRNA적표체,차이유통계학의의(F=178.293,86.404,176.102;P＜0.01);수착라격렬동농도적증고,억제작용상응증강,상린약물농도간A치차이균유통계학의의(q치개우3.00～10.36지간,P＜0.05).결론 라격렬동능명현억제HTFs증식화이행,기작용여기억제TGF-β1적분비유관.
Objective To investigate the effect of Rosiglitazone on the proliferation and the production of transforming growth factor-β1 (TGF-β1 )in cultured humans Tenon's capsule fibroblasts (HTFs). Methods It was a experimental study. HTFs were cultured and subcultured in vitro. After HTFs were treated with different concentrations of Rosiglitazone, the proliferation was detected by MTT assay. The migration ability was detected by a scratch method. The production of TGF-β1 was determined by ELISA.TGF-β1 mRNA expression was examined by semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results Compared with control group, Rosiglitazone significantly ( F = 178. 293, P < 0.01 )inhibited the proliferation ( 0. 33±0. 01 vs 0. 29±0. 02 ) and the migration of HTFs in a dose-dependent manner with the concentrations ranged from 20 to 500 mg/L. Rosiglitazone also significantly ( F = 86. 404,P < 0. 01 ) reduced the production of TGF-β1 in HTFs (323.48±13.69 vs 267. 48±20. 31 ). TGF-β1 mRNA was significantly ( F = 176. 102, P < 0. 01 ) down-regulated ( 0. 69±O. 02 vs 0. 55±0.02 ) .Conclusions This study suggests that the inhibition of the proliferation of Tenon's capsule and the migration of HTFs by Rosiglitazone is due, at least in part, to decrease the production of TGF-β1.
