CAJ | 학술논문

采用PCR和定点突变法,对马铃薯Y病毒中国株系(Chinese strain of potato Y potyvirus, PVY_C) 蚜传辅助成分(helper component proteinase, HC_Pro)基因中心区域的CCCT 基序和PTK基序进行了定点改造,获得了4种突变体.然后将突变体克隆到植物表达载体pBin438 中, 所得到的重组体通过根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens (Smith et Townsend) Conn)介导法转化了烟草(Nicotiana tabacum L. cv. K326). Southern blotting和Western blotting分析表明4种突变体已经成功地整合到烟草的基因组中, 并在蛋白水平上得到了表达.马铃薯X病毒(potato X potexvirus, PVX)对转基因烟草的攻毒实验表明, 4种突变体均使PVY_C HC_Pro严重丧失了促进PVX病毒粒子在寄主体内积累和提高 PVX致病性的功能,说明CCCT、PTK基序为PVY_C HC_Pro介导PVX/PVY协生作用所必需.同时证明了HC_Pro具有增强PVX在寄主体内长距离运输的功能.
채용PCR화정점돌변법,대마령서Y병독중국주계(Chinese strain of potato Y potyvirus, PVY_C) 아전보조성분(helper component proteinase, HC_Pro)기인중심구역적CCCT 기서화PTK기서진행료정점개조,획득료4충돌변체.연후장돌변체극륭도식물표체재체pBin438 중, 소득도적중조체통과근암토양간균(Agrobacterium tumefaciens (Smith et Townsend) Conn)개도법전화료연초(Nicotiana tabacum L. cv. K326). Southern blotting화Western blotting분석표명4충돌변체이경성공지정합도연초적기인조중, 병재단백수평상득도료표체.마령서X병독(potato X potexvirus, PVX)대전기인연초적공독실험표명, 4충돌변체균사PVY_C HC_Pro엄중상실료촉진PVX병독입자재기주체내적루화제고 PVX치병성적공능,설명CCCT、PTK기서위PVY_C HC_Pro개도PVX/PVY협생작용소필수.동시증명료HC_Pro구유증강PVX재기주체내장거리운수적공능.