第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
12期
1482-1484,1497
,共4页
谭康联%李志杰%刘靖华%黄浩%唐靖%邓鹏%姜勇
譚康聯%李誌傑%劉靖華%黃浩%唐靖%鄧鵬%薑勇
담강련%리지걸%류정화%황호%당정%산붕%강용
HPC2%载体构建%基因表达%转染
HPC2%載體構建%基因錶達%轉染
HPC2%재체구건%기인표체%전염
目的构建在哺乳动物细胞中表达的HPC2真核表达载体,并分析其在HEK293细胞中的表达.方法从重组pcDNA3/HPC2载体上将HPC2 cDNA序列亚克隆至带有flag标记的真核表达载体pcDNA3-flag上,经PCR、酶切和测序鉴定,将重组质粒pcDNA3-flag/HPC2用脂质体瞬时转染HEK293细胞,细胞裂解后,用Western blot分析并观察HPC2在HEK293细胞中的表达情况.结果PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pcDNA3-flag/HPC2构建正确,并可在HEK293细胞内高效表达.结论成功构建了pcDNA3-flag/HPC2真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达,为进一步研究HPC2的功能提供了重要的实验材料.
目的構建在哺乳動物細胞中錶達的HPC2真覈錶達載體,併分析其在HEK293細胞中的錶達.方法從重組pcDNA3/HPC2載體上將HPC2 cDNA序列亞剋隆至帶有flag標記的真覈錶達載體pcDNA3-flag上,經PCR、酶切和測序鑒定,將重組質粒pcDNA3-flag/HPC2用脂質體瞬時轉染HEK293細胞,細胞裂解後,用Western blot分析併觀察HPC2在HEK293細胞中的錶達情況.結果PCR、酶切和DNA測序結果均錶明重組質粒pcDNA3-flag/HPC2構建正確,併可在HEK293細胞內高效錶達.結論成功構建瞭pcDNA3-flag/HPC2真覈錶達載體,該載體能在哺乳動物細胞中有效錶達,為進一步研究HPC2的功能提供瞭重要的實驗材料.
목적구건재포유동물세포중표체적HPC2진핵표체재체,병분석기재HEK293세포중적표체.방법종중조pcDNA3/HPC2재체상장HPC2 cDNA서렬아극륭지대유flag표기적진핵표체재체pcDNA3-flag상,경PCR、매절화측서감정,장중조질립pcDNA3-flag/HPC2용지질체순시전염HEK293세포,세포렬해후,용Western blot분석병관찰HPC2재HEK293세포중적표체정황.결과PCR、매절화DNA측서결과균표명중조질립pcDNA3-flag/HPC2구건정학,병가재HEK293세포내고효표체.결론성공구건료pcDNA3-flag/HPC2진핵표체재체,해재체능재포유동물세포중유효표체,위진일보연구HPC2적공능제공료중요적실험재료.
