微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
1期
158-161
,共4页
曹胜波%孙敏轩%刘学芹%刘新文%陈焕春
曹勝波%孫敏軒%劉學芹%劉新文%陳煥春
조성파%손민헌%류학근%류신문%진환춘
嵌合猪圆环病毒%感染性%鉴定
嵌閤豬圓環病毒%感染性%鑒定
감합저원배병독%감염성%감정
猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)是当前严重危害养猪业的重要病原之一.目前,世界上还没有有效疫苗用于该病毒的免疫预防.该研究利用PCR方法,将PCV2的ORF2基因替换猪Ⅰ型圆环病毒(PCV1)的ORF2基因,构建了以PCV1基因组为骨架的嵌合病毒(PCV1-2)分子克隆(pSK2PCV1-2).将该分子克隆转染PK-15细胞并连续盲传5代,用RT-PCR方法可以在转染后盲传的细胞中检测到PCV1的ORF1 mRNA和PCV2的ORF2 mRNA,但检测不到PCV1的ORF2 mRNA和PCV2的ORF1 mRNA.间接免疫荧光检测显示在盲传第5代的细胞中有PCV2 ORF2蛋白的表达,表达蛋白主要分布于细胞核.该研究初步证实构建的PCV1-2分子克隆转染细胞后可以形成具有感染性的嵌合病毒,从而为更深入研究嵌合病毒生物学特性奠定了基础.
豬Ⅱ型圓環病毒(PCV2)是噹前嚴重危害養豬業的重要病原之一.目前,世界上還沒有有效疫苗用于該病毒的免疫預防.該研究利用PCR方法,將PCV2的ORF2基因替換豬Ⅰ型圓環病毒(PCV1)的ORF2基因,構建瞭以PCV1基因組為骨架的嵌閤病毒(PCV1-2)分子剋隆(pSK2PCV1-2).將該分子剋隆轉染PK-15細胞併連續盲傳5代,用RT-PCR方法可以在轉染後盲傳的細胞中檢測到PCV1的ORF1 mRNA和PCV2的ORF2 mRNA,但檢測不到PCV1的ORF2 mRNA和PCV2的ORF1 mRNA.間接免疫熒光檢測顯示在盲傳第5代的細胞中有PCV2 ORF2蛋白的錶達,錶達蛋白主要分佈于細胞覈.該研究初步證實構建的PCV1-2分子剋隆轉染細胞後可以形成具有感染性的嵌閤病毒,從而為更深入研究嵌閤病毒生物學特性奠定瞭基礎.
저Ⅱ형원배병독(PCV2)시당전엄중위해양저업적중요병원지일.목전,세계상환몰유유효역묘용우해병독적면역예방.해연구이용PCR방법,장PCV2적ORF2기인체환저Ⅰ형원배병독(PCV1)적ORF2기인,구건료이PCV1기인조위골가적감합병독(PCV1-2)분자극륭(pSK2PCV1-2).장해분자극륭전염PK-15세포병련속맹전5대,용RT-PCR방법가이재전염후맹전적세포중검측도PCV1적ORF1 mRNA화PCV2적ORF2 mRNA,단검측불도PCV1적ORF2 mRNA화PCV2적ORF1 mRNA.간접면역형광검측현시재맹전제5대적세포중유PCV2 ORF2단백적표체,표체단백주요분포우세포핵.해연구초보증실구건적PCV1-2분자극륭전염세포후가이형성구유감염성적감합병독,종이위경심입연구감합병독생물학특성전정료기출.
