甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
1期
7-13
,共7页
孙晓林%景志忠%王佩雅%才学鹏
孫曉林%景誌忠%王珮雅%纔學鵬
손효림%경지충%왕패아%재학붕
猪带绦虫%六钩蚴%45W-4BX%单克隆抗体
豬帶縚蟲%六鉤蚴%45W-4BX%單剋隆抗體
저대조충%륙구유%45W-4BX%단극륭항체
将纯化的猪带绦虫六钩蚴45W-4BX重组抗原,采用弗氏完全、不完全佐剂乳化和不加佐剂的方式,3次免疫BALB/C小鼠,检测抗体效价呈阳性后,再经尾静脉加强免疫,取其脾细胞和SP2/0细胞融合,经六钩蚴45W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,获得了18株六钩蚴45W-4BX杂交瘤细胞,按有限稀释法对其中的4株进行了5次亚克隆,最终获取了4株分泌稳定的单克隆细胞株,接种小鼠获取相应的腹水,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型;对腹水进行了稳定性试验和单抗初步提纯,并对杂交瘤细胞进行了染色体组型的分析,证明所获单抗能满足常规试验的要求.
將純化的豬帶縚蟲六鉤蚴45W-4BX重組抗原,採用弗氏完全、不完全佐劑乳化和不加佐劑的方式,3次免疫BALB/C小鼠,檢測抗體效價呈暘性後,再經尾靜脈加彊免疫,取其脾細胞和SP2/0細胞融閤,經六鉤蚴45W-4BX抗原和GST抗原雙繫統間接ELISA篩選,穫得瞭18株六鉤蚴45W-4BX雜交瘤細胞,按有限稀釋法對其中的4株進行瞭5次亞剋隆,最終穫取瞭4株分泌穩定的單剋隆細胞株,接種小鼠穫取相應的腹水,金標試紙條法鑒定其抗體亞類均屬于IgG1類,輕鏈為κ型;對腹水進行瞭穩定性試驗和單抗初步提純,併對雜交瘤細胞進行瞭染色體組型的分析,證明所穫單抗能滿足常規試驗的要求.
장순화적저대조충륙구유45W-4BX중조항원,채용불씨완전、불완전좌제유화화불가좌제적방식,3차면역BALB/C소서,검측항체효개정양성후,재경미정맥가강면역,취기비세포화SP2/0세포융합,경륙구유45W-4BX항원화GST항원쌍계통간접ELISA사선,획득료18주륙구유45W-4BX잡교류세포,안유한희석법대기중적4주진행료5차아극륭,최종획취료4주분비은정적단극륭세포주,접충소서획취상응적복수,금표시지조법감정기항체아류균속우IgG1류,경련위κ형;대복수진행료은정성시험화단항초보제순,병대잡교류세포진행료염색체조형적분석,증명소획단항능만족상규시험적요구.
