CAJ | 학술논문

背景与目的肺癌是对人类健康和生命危害最大的恶性肿瘤.肺癌转移是肺癌的恶性标志和特征,也是肺癌病人治疗失败和死亡的主要原因.人参皂苷Rg3具有明显的抗肿瘤效应,该研究将应用双向凝胶电泳技术探讨人参皂苷Rg3抗肺癌侵袭转移分子作用机制.方法筛选人参皂苷Rg3作用于人肺巨细胞癌高转移细胞株的半抑制浓度(IC50),用0.1倍半抑制浓度(0.1 × IC50)的Rg3溶液作用人肺巨细胞癌高转移细胞株95D 72 h,利用同相PH梯度双向凝胶电泳分离Rg3处理前后人肺巨细胞癌高转移细胞株95D的总蛋白,用图像分析软件比较分析Rg3处理前后细胞间的差异表达蛋白质.对15个差异表达的蛋13质点通过MALD-TOF-MS/MS,LC-MS/MS和蛋白质数据库检索进行鉴定.结果人参皂苷Rg3作用人肺巨细胞癌高转移细胞株95D的半抑制浓度为100μg/mL.有12个蛋白点仅在对照组细胞株中出现,有6个蛋白点仅在药物处理组出现;在对照组与药物处理组中都存在,但在对照组中高表达的蛋白点有7个,在药物处理组中高表达的蛋白点有2个.通过对差异明显的15个蛋白质点进行质谱鉴定和蛋白质数据库查询.发现氯离子通道蛋白1(Chloride intracelular channel protein 1)、泛素结合酶E2-25 Kda(Ubiquitin-Conjugating Enzyme E2-25 Kda)等蛋白只在对照组有表达;14-3-30蛋白(14-3-3 protein theta)、ski作用蛋白(SKI-interacting protein)只在药物处理组有表达;膜联蛋白A2(annexin A2)、肌动蛋白结合蛋白Ⅱ同构体b(profilin 2 isoform b)等蛋白在对照组的表达量显著高于药物处理组;14-3-3ξ蛋白(14-3-3 protein zela),真核翻译起始因子4H(Eukaryotic translation initiation factor 4H)在药物处理组的表达量显著高于对照组.结论该研究结果提示Rg3处理前后人肺巨细胞癌高转移细胞株蛋白质组的表达存在明显差异,鉴定的差异蛋白质多与肿瘤的侵袭转移相关.这些差异蛋白质有可能为进一步发现与肺癌转移相关的分子标志物和阐明人参皂苷Rg3抗肺癌侵袭转移的分子作用机制提供线索. 揹景與目的肺癌是對人類健康和生命危害最大的噁性腫瘤.肺癌轉移是肺癌的噁性標誌和特徵,也是肺癌病人治療失敗和死亡的主要原因.人參皂苷Rg3具有明顯的抗腫瘤效應,該研究將應用雙嚮凝膠電泳技術探討人參皂苷Rg3抗肺癌侵襲轉移分子作用機製.方法篩選人參皂苷Rg3作用于人肺巨細胞癌高轉移細胞株的半抑製濃度(IC50),用0.1倍半抑製濃度(0.1 × IC50)的Rg3溶液作用人肺巨細胞癌高轉移細胞株95D 72 h,利用同相PH梯度雙嚮凝膠電泳分離Rg3處理前後人肺巨細胞癌高轉移細胞株95D的總蛋白,用圖像分析軟件比較分析Rg3處理前後細胞間的差異錶達蛋白質.對15箇差異錶達的蛋13質點通過MALD-TOF-MS/MS,LC-MS/MS和蛋白質數據庫檢索進行鑒定.結果人參皂苷Rg3作用人肺巨細胞癌高轉移細胞株95D的半抑製濃度為100μg/mL.有12箇蛋白點僅在對照組細胞株中齣現,有6箇蛋白點僅在藥物處理組齣現;在對照組與藥物處理組中都存在,但在對照組中高錶達的蛋白點有7箇,在藥物處理組中高錶達的蛋白點有2箇.通過對差異明顯的15箇蛋白質點進行質譜鑒定和蛋白質數據庫查詢.髮現氯離子通道蛋白1(Chloride intracelular channel protein 1)、汎素結閤酶E2-25 Kda(Ubiquitin-Conjugating Enzyme E2-25 Kda)等蛋白隻在對照組有錶達;14-3-30蛋白(14-3-3 protein theta)、ski作用蛋白(SKI-interacting protein)隻在藥物處理組有錶達;膜聯蛋白A2(annexin A2)、肌動蛋白結閤蛋白Ⅱ同構體b(profilin 2 isoform b)等蛋白在對照組的錶達量顯著高于藥物處理組;14-3-3ξ蛋白(14-3-3 protein zela),真覈翻譯起始因子4H(Eukaryotic translation initiation factor 4H)在藥物處理組的錶達量顯著高于對照組.結論該研究結果提示Rg3處理前後人肺巨細胞癌高轉移細胞株蛋白質組的錶達存在明顯差異,鑒定的差異蛋白質多與腫瘤的侵襲轉移相關.這些差異蛋白質有可能為進一步髮現與肺癌轉移相關的分子標誌物和闡明人參皂苷Rg3抗肺癌侵襲轉移的分子作用機製提供線索.
배경여목적 폐암시대인류건강화생명위해최대적악성종류.폐암전이시폐암적악성표지화특정,야시폐암병인치료실패화사망적주요원인.인삼조감Rg3구유명현적항종류효응,해연구장응용쌍향응효전영기술탐토인삼조감Rg3항폐암침습전이분자작용궤제.방법 사선인삼조감Rg3작용우인폐거세포암고전이세포주적반억제농도(IC50),용0.1배반억제농도(0.1 × IC50)적Rg3용액작용인폐거세포암고전이세포주95D 72 h,이용동상PH제도쌍향응효전영분리Rg3처리전후인폐거세포암고전이세포주95D적총단백,용도상분석연건비교분석Rg3처리전후세포간적차이표체단백질.대15개차이표체적단13질점통과MALD-TOF-MS/MS,LC-MS/MS화단백질수거고검색진행감정.결과 인삼조감Rg3작용인폐거세포암고전이세포주95D적반억제농도위100μg/mL.유12개단백점부재대조조세포주중출현,유6개단백점부재약물처리조출현;재대조조여약물처리조중도존재,단재대조조중고표체적단백점유7개,재약물처리조중고표체적단백점유2개.통과대차이명현적15개단백질점진행질보감정화단백질수거고사순.발현록리자통도단백1(Chloride intracelular channel protein 1)、범소결합매E2-25 Kda(Ubiquitin-Conjugating Enzyme E2-25 Kda)등단백지재대조조유표체;14-3-30단백(14-3-3 protein theta)、ski작용단백(SKI-interacting protein)지재약물처리조유표체;막련단백A2(annexin A2)、기동단백결합단백Ⅱ동구체b(profilin 2 isoform b)등단백재대조조적표체량현저고우약물처리조;14-3-3ξ단백(14-3-3 protein zela),진핵번역기시인자4H(Eukaryotic translation initiation factor 4H)재약물처리조적표체량현저고우대조조.결론 해연구결과제시Rg3처리전후인폐거세포암고전이세포주단백질조적표체존재명현차이,감정적차이단백질다여종류적침습전이상관.저사차이단백질유가능위진일보발현여폐암전이상관적분자표지물화천명인삼조감Rg3항폐암침습전이적분자작용궤제제공선색.