生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
8期
1348-1353
,共6页
桂磊%梁勇%魏东盛%郑雯%邢来君%李明春
桂磊%樑勇%魏東盛%鄭雯%邢來君%李明春
계뢰%량용%위동성%정문%형래군%리명춘
定点突变%白念珠茵%Rim101蛋白%高铁还原酶基因
定點突變%白唸珠茵%Rim101蛋白%高鐵還原酶基因
정점돌변%백념주인%Rim101단백%고철환원매기인
通过对白念珠茵高铁还原酶基因FRP1启动子进行突变分析,确认启动子中特殊调控元件.我们通过分析FRP1起始密码子上游1000bp序列发现在-160和-650处有2个推测的Rim101p结合位点,对其分别进行定点突变,然后构建启动子与报告基因LacZ融合质粒,转化整合到白念珠菌rim101-1-株和野生株中,检测不同缺铁条件下β-半乳糖苷酶活性.结果发现碱性条件,Rim101p能够正向调控FRP1的表达;启动子-160处突变对启动子功能影响较弱,而-650突变使启动子活性大大降低,此结果和双突变的结果相同,表明Rim101p主要通过与启动子-650处结合位点相互作用来调控FRP1的表迭.
通過對白唸珠茵高鐵還原酶基因FRP1啟動子進行突變分析,確認啟動子中特殊調控元件.我們通過分析FRP1起始密碼子上遊1000bp序列髮現在-160和-650處有2箇推測的Rim101p結閤位點,對其分彆進行定點突變,然後構建啟動子與報告基因LacZ融閤質粒,轉化整閤到白唸珠菌rim101-1-株和野生株中,檢測不同缺鐵條件下β-半乳糖苷酶活性.結果髮現堿性條件,Rim101p能夠正嚮調控FRP1的錶達;啟動子-160處突變對啟動子功能影響較弱,而-650突變使啟動子活性大大降低,此結果和雙突變的結果相同,錶明Rim101p主要通過與啟動子-650處結閤位點相互作用來調控FRP1的錶迭.
통과대백념주인고철환원매기인FRP1계동자진행돌변분석,학인계동자중특수조공원건.아문통과분석FRP1기시밀마자상유1000bp서렬발현재-160화-650처유2개추측적Rim101p결합위점,대기분별진행정점돌변,연후구건계동자여보고기인LacZ융합질립,전화정합도백념주균rim101-1-주화야생주중,검측불동결철조건하β-반유당감매활성.결과발현감성조건,Rim101p능구정향조공FRP1적표체;계동자-160처돌변대계동자공능영향교약,이-650돌변사계동자활성대대강저,차결과화쌍돌변적결과상동,표명Rim101p주요통과여계동자-650처결합위점상호작용래조공FRP1적표질.
