中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
11期
1300-1302
,共3页
陈新军%袁先厚%吴勉云%江普查%马超%文志华
陳新軍%袁先厚%吳勉雲%江普查%馬超%文誌華
진신군%원선후%오면운%강보사%마초%문지화
胶质瘤%碱基%启动子%DNA甲基化
膠質瘤%堿基%啟動子%DNA甲基化
효질류%감기%계동자%DNA갑기화
目的 观察人脑胶质瘤U251细胞系中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态及其在肿瘤发生中的作用.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法对人脑胶质瘤U251细胞系的hMLH1、hMSH2基因启动子CpG岛甲基化进行检测;培养人脑胶质瘤12251细胞系,MSP法检测加入5-aza-2'-deoxycytidine前后hMSH2基因在人脑胶质瘤U251细胞中的甲基化状态改变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测加入5-aza-2'-deoxycytidine前后hMSH2在人脑胶质瘤U251细胞中的mRNA表达改变.结果 人脑胶质瘤U251细胞中未发生hMLH1启动子甲基化,而发生了hMSH2启动子甲基化;5-aza-2'-deoxycytidine处理细胞株后,可逆转hMSH2启动子甲基化,细胞株的mRNA表达增加,加药前后的平均灰度比值分别为(0.40±0.18;0.85±0.32,P<0.01),差异有统计学意义.结论 人脑胶质瘤U251细胞系中hMSH2基因启动子CpG岛高甲基化,5-aza-2'-deoxycytidine能完全逆转hMSH2基因高甲基化状态,可为临床诊断人脑胶质瘤提供新的检测指标和治疗靶点.
目的 觀察人腦膠質瘤U251細胞繫中hMLH1、hMSH2基因啟動子區的甲基化狀態及其在腫瘤髮生中的作用.方法 採用甲基化特異性聚閤酶鏈反應(MSP)法對人腦膠質瘤U251細胞繫的hMLH1、hMSH2基因啟動子CpG島甲基化進行檢測;培養人腦膠質瘤12251細胞繫,MSP法檢測加入5-aza-2'-deoxycytidine前後hMSH2基因在人腦膠質瘤U251細胞中的甲基化狀態改變;逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法檢測加入5-aza-2'-deoxycytidine前後hMSH2在人腦膠質瘤U251細胞中的mRNA錶達改變.結果 人腦膠質瘤U251細胞中未髮生hMLH1啟動子甲基化,而髮生瞭hMSH2啟動子甲基化;5-aza-2'-deoxycytidine處理細胞株後,可逆轉hMSH2啟動子甲基化,細胞株的mRNA錶達增加,加藥前後的平均灰度比值分彆為(0.40±0.18;0.85±0.32,P<0.01),差異有統計學意義.結論 人腦膠質瘤U251細胞繫中hMSH2基因啟動子CpG島高甲基化,5-aza-2'-deoxycytidine能完全逆轉hMSH2基因高甲基化狀態,可為臨床診斷人腦膠質瘤提供新的檢測指標和治療靶點.
목적 관찰인뇌효질류U251세포계중hMLH1、hMSH2기인계동자구적갑기화상태급기재종류발생중적작용.방법 채용갑기화특이성취합매련반응(MSP)법대인뇌효질류U251세포계적hMLH1、hMSH2기인계동자CpG도갑기화진행검측;배양인뇌효질류12251세포계,MSP법검측가입5-aza-2'-deoxycytidine전후hMSH2기인재인뇌효질류U251세포중적갑기화상태개변;역전록-취합매련반응(RT-PCR)법검측가입5-aza-2'-deoxycytidine전후hMSH2재인뇌효질류U251세포중적mRNA표체개변.결과 인뇌효질류U251세포중미발생hMLH1계동자갑기화,이발생료hMSH2계동자갑기화;5-aza-2'-deoxycytidine처리세포주후,가역전hMSH2계동자갑기화,세포주적mRNA표체증가,가약전후적평균회도비치분별위(0.40±0.18;0.85±0.32,P<0.01),차이유통계학의의.결론 인뇌효질류U251세포계중hMSH2기인계동자CpG도고갑기화,5-aza-2'-deoxycytidine능완전역전hMSH2기인고갑기화상태,가위림상진단인뇌효질류제공신적검측지표화치료파점.