中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2004年
2期
78-80
,共3页
张丽春%杨鹏%蒋效松%薛越强%琦祖和
張麗春%楊鵬%蔣效鬆%薛越彊%琦祖和
장려춘%양붕%장효송%설월강%기조화
载脂蛋白E类%小鼠,转基因%纯合子
載脂蛋白E類%小鼠,轉基因%純閤子
재지단백E류%소서,전기인%순합자
目的载脂蛋白E(apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质,并且与迟发型早老性痴呆(AD)相关.为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系,我们拟培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠.方法将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配,仔代经PCR初筛,再行Southern杂交鉴定,杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍.经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57BL/6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定.结果 Southem杂交鉴定出F1代转基因小鼠6只,F2代转基因小鼠7只,其中纯合子3只.将所得到的纯合子小鼠与正常的C57BL/6小鼠交配,仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性.结论通过培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠,发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合.
目的載脂蛋白E(apoE)是血漿中參與脂質代謝的重要蛋白質,併且與遲髮型早老性癡呆(AD)相關.為從整體水平研究人突變ApoE基因劑量與效應的關繫,我們擬培育C57BL/6-hApoE7純閤子轉基因小鼠.方法將經Southern雜交鑒定為暘性的F1代小鼠進行互配,仔代經PCR初篩,再行Southern雜交鑒定,雜交結果經掃描定量分析以確定hApoE7基因整閤的拷貝數,純閤子小鼠的拷貝數為雜閤子的兩倍.經此法鑒定的純閤子小鼠與正常C57BL/6小鼠進行側交以進行進一步的鑒定.結果 Southem雜交鑒定齣F1代轉基因小鼠6隻,F2代轉基因小鼠7隻,其中純閤子3隻.將所得到的純閤子小鼠與正常的C57BL/6小鼠交配,仔代鼠經PCR鑒定結果全部為暘性.結論通過培育C57BL/6-hApoE7純閤子轉基因小鼠,髮現人ApoE7基因在轉基因小鼠體內可以穩定遺傳,轉基因的遺傳特徵符閤常染色體單位點整閤.
목적재지단백E(apoE)시혈장중삼여지질대사적중요단백질,병차여지발형조로성치태(AD)상관.위종정체수평연구인돌변ApoE기인제량여효응적관계,아문의배육C57BL/6-hApoE7순합자전기인소서.방법장경Southern잡교감정위양성적F1대소서진행호배,자대경PCR초사,재행Southern잡교감정,잡교결과경소묘정량분석이학정hApoE7기인정합적고패수,순합자소서적고패수위잡합자적량배.경차법감정적순합자소서여정상C57BL/6소서진행측교이진행진일보적감정.결과 Southem잡교감정출F1대전기인소서6지,F2대전기인소서7지,기중순합자3지.장소득도적순합자소서여정상적C57BL/6소서교배,자대서경PCR감정결과전부위양성.결론통과배육C57BL/6-hApoE7순합자전기인소서,발현인ApoE7기인재전기인소서체내가이은정유전,전기인적유전특정부합상염색체단위점정합.
