中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2005年
3期
309-314
,共6页
李鸿钧%马雁冰%张鸣%张林虹%张光明%戴长柏%孙茂盛
李鴻鈞%馬雁冰%張鳴%張林虹%張光明%戴長柏%孫茂盛
리홍균%마안빙%장명%장림홍%장광명%대장백%손무성
CNTFM基因%表达%产物纯化%生物学活性
CNTFM基因%錶達%產物純化%生物學活性
CNTFM기인%표체%산물순화%생물학활성
采用PCR的方法对睫状神经营养因子(CNTF)基因进行改造,获得CNTF突变体基因(CNTFM),将CNTFM基因克隆入表达载体pBV220,在大肠杆菌BL-21(Gold)中进行了表达.目的蛋白占细胞总蛋白55%左右,以包涵体形式存在,经Superdex-75凝胶过滤柱一步纯化和复性,获得纯度达90%目的蛋白.纯化的重组CNTFM蛋白能促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,能明显减轻实验小鼠的体重,表明CNTFM具有良好的体内、体外生物学活性,为开发新型高效的减肥药奠定了基础.
採用PCR的方法對睫狀神經營養因子(CNTF)基因進行改造,穫得CNTF突變體基因(CNTFM),將CNTFM基因剋隆入錶達載體pBV220,在大腸桿菌BL-21(Gold)中進行瞭錶達.目的蛋白佔細胞總蛋白55%左右,以包涵體形式存在,經Superdex-75凝膠過濾柱一步純化和複性,穫得純度達90%目的蛋白.純化的重組CNTFM蛋白能促進培養的鷄胚揹根神經節長齣神經突起,能明顯減輕實驗小鼠的體重,錶明CNTFM具有良好的體內、體外生物學活性,為開髮新型高效的減肥藥奠定瞭基礎.
채용PCR적방법대첩상신경영양인자(CNTF)기인진행개조,획득CNTF돌변체기인(CNTFM),장CNTFM기인극륭입표체재체pBV220,재대장간균BL-21(Gold)중진행료표체.목적단백점세포총단백55%좌우,이포함체형식존재,경Superdex-75응효과려주일보순화화복성,획득순도체90%목적단백.순화적중조CNTFM단백능촉진배양적계배배근신경절장출신경돌기,능명현감경실험소서적체중,표명CNTFM구유량호적체내、체외생물학활성,위개발신형고효적감비약전정료기출.
