第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
4期
425-428
,共4页
高蓉%舒翠莉%李靖%迟淑萍%赵军%陈昊%李伯安%程云
高蓉%舒翠莉%李靖%遲淑萍%趙軍%陳昊%李伯安%程雲
고용%서취리%리정%지숙평%조군%진호%리백안%정운
丙型肝炎病毒%高变区%模拟表位%细胞免疫%基因免疫
丙型肝炎病毒%高變區%模擬錶位%細胞免疫%基因免疫
병형간염병독%고변구%모의표위%세포면역%기인면역
目的:以真核质粒pcDN3.1(+)为载体携带丙肝病毒高变区1(HVR1)相关模拟表位DNA序列对小鼠进行基因免疫,观察其诱导细胞免疫反应的效果.方法:根据HCV HVR1模拟表位多肽序列,合成DNA序列,并将其连接到pcDN3.1(+)上,构建为pcDN3.1-SP.免疫中分别采用2种剂量pcDN3.1-SP(10μg和100 μg),以及10μg质粒中混合了非甲基化CpG基序(-CpG),以其作为佐剂增强免疫原性,并比较其与100μg剂量的免疫效果.杀鼠、收集血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠体液中的抗体;脾细胞经混合肽刺激后,用流式细胞仪检测CD8+IFN-γ+细胞;用非放射性MTS法检测细胞增殖反应;以非放射性LDH法检测CTL反应.结果:混合肽体外刺激100μg和10μg-CpG基因免疫小鼠脾淋巴细胞后,T细胞增殖反应明显;脾淋巴细胞中CD8+IFN-γ+细胞增多;并能检测到明显的CTL反应,同时伴有较弱体液免疫反应.结论:合成的模拟表位中可能含有T细胞和B细胞表位;非甲基化CpG基序增强了DNA免疫效果.
目的:以真覈質粒pcDN3.1(+)為載體攜帶丙肝病毒高變區1(HVR1)相關模擬錶位DNA序列對小鼠進行基因免疫,觀察其誘導細胞免疫反應的效果.方法:根據HCV HVR1模擬錶位多肽序列,閤成DNA序列,併將其連接到pcDN3.1(+)上,構建為pcDN3.1-SP.免疫中分彆採用2種劑量pcDN3.1-SP(10μg和100 μg),以及10μg質粒中混閤瞭非甲基化CpG基序(-CpG),以其作為佐劑增彊免疫原性,併比較其與100μg劑量的免疫效果.殺鼠、收集血清、分離脾細胞;ELISA法檢測小鼠體液中的抗體;脾細胞經混閤肽刺激後,用流式細胞儀檢測CD8+IFN-γ+細胞;用非放射性MTS法檢測細胞增殖反應;以非放射性LDH法檢測CTL反應.結果:混閤肽體外刺激100μg和10μg-CpG基因免疫小鼠脾淋巴細胞後,T細胞增殖反應明顯;脾淋巴細胞中CD8+IFN-γ+細胞增多;併能檢測到明顯的CTL反應,同時伴有較弱體液免疫反應.結論:閤成的模擬錶位中可能含有T細胞和B細胞錶位;非甲基化CpG基序增彊瞭DNA免疫效果.
목적:이진핵질립pcDN3.1(+)위재체휴대병간병독고변구1(HVR1)상관모의표위DNA서렬대소서진행기인면역,관찰기유도세포면역반응적효과.방법:근거HCV HVR1모의표위다태서렬,합성DNA서렬,병장기련접도pcDN3.1(+)상,구건위pcDN3.1-SP.면역중분별채용2충제량pcDN3.1-SP(10μg화100 μg),이급10μg질립중혼합료비갑기화CpG기서(-CpG),이기작위좌제증강면역원성,병비교기여100μg제량적면역효과.살서、수집혈청、분리비세포;ELISA법검측소서체액중적항체;비세포경혼합태자격후,용류식세포의검측CD8+IFN-γ+세포;용비방사성MTS법검측세포증식반응;이비방사성LDH법검측CTL반응.결과:혼합태체외자격100μg화10μg-CpG기인면역소서비림파세포후,T세포증식반응명현;비림파세포중CD8+IFN-γ+세포증다;병능검측도명현적CTL반응,동시반유교약체액면역반응.결론:합성적모의표위중가능함유T세포화B세포표위;비갑기화CpG기서증강료DNA면역효과.
