高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2005年
11期
101-105
,共5页
张宝玉%王广策%齐雨藻%邹景忠%曾呈奎
張寶玉%王廣策%齊雨藻%鄒景忠%曾呈奎
장보옥%왕엄책%제우조%추경충%증정규
荧光原位杂交%ITS 序列%甲藻%赤潮
熒光原位雜交%ITS 序列%甲藻%赤潮
형광원위잡교%ITS 서렬%갑조%적조
探索了用荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)技术检测赤潮藻的可行性.用FISH技术鉴定了2株已知的赤潮甲藻--东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)和塔马亚历山大藻(Alexandrium tamarense).荧光标记的DNA探针是东海原甲藻的核糖体转录单元内间隔区(ITS)序列.研究结果如下:(1)在荧光显微镜下观察与荧光探针杂交后的东海原甲藻细胞,在细胞顶端可见绿色的荧光,而作为对照的塔马亚历山大藻在与标记的探针杂交后没有产生绿色荧光,说明探针只与目标株东海原甲藻反应,不与对照组反应,表明根据ITS序列设计的探针是高度特异的,(2)材料固定后,经蓝光激发,均未产生细胞内源的叶绿素和甲藻素等色素荧光干扰杂交信号的现象,说明固定材料的方法正确.以上的结果表明,FISH技术在鉴定赤潮微藻方面具有其它技术无法比拟的优越性:准确、快速、简单,将其应用到现场定性、定量检测赤潮微藻方面将具有很大的潜力.
探索瞭用熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)技術檢測赤潮藻的可行性.用FISH技術鑒定瞭2株已知的赤潮甲藻--東海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)和塔馬亞歷山大藻(Alexandrium tamarense).熒光標記的DNA探針是東海原甲藻的覈糖體轉錄單元內間隔區(ITS)序列.研究結果如下:(1)在熒光顯微鏡下觀察與熒光探針雜交後的東海原甲藻細胞,在細胞頂耑可見綠色的熒光,而作為對照的塔馬亞歷山大藻在與標記的探針雜交後沒有產生綠色熒光,說明探針隻與目標株東海原甲藻反應,不與對照組反應,錶明根據ITS序列設計的探針是高度特異的,(2)材料固定後,經藍光激髮,均未產生細胞內源的葉綠素和甲藻素等色素熒光榦擾雜交信號的現象,說明固定材料的方法正確.以上的結果錶明,FISH技術在鑒定赤潮微藻方麵具有其它技術無法比擬的優越性:準確、快速、簡單,將其應用到現場定性、定量檢測赤潮微藻方麵將具有很大的潛力.
탐색료용형광원위잡교(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)기술검측적조조적가행성.용FISH기술감정료2주이지적적조갑조--동해원갑조(Prorocentrum donghaiense)화탑마아력산대조(Alexandrium tamarense).형광표기적DNA탐침시동해원갑조적핵당체전록단원내간격구(ITS)서렬.연구결과여하:(1)재형광현미경하관찰여형광탐침잡교후적동해원갑조세포,재세포정단가견록색적형광,이작위대조적탑마아력산대조재여표기적탐침잡교후몰유산생록색형광,설명탐침지여목표주동해원갑조반응,불여대조조반응,표명근거ITS서렬설계적탐침시고도특이적,(2)재료고정후,경람광격발,균미산생세포내원적협록소화갑조소등색소형광간우잡교신호적현상,설명고정재료적방법정학.이상적결과표명,FISH기술재감정적조미조방면구유기타기술무법비의적우월성:준학、쾌속、간단,장기응용도현장정성、정량검측적조미조방면장구유흔대적잠력.
