家禽科学
傢禽科學
가금과학
POULTRY SCIENCE
2006年
1期
13-16
,共4页
黄兵%于可响%高月花%宋敏训%牟建青%李峰
黃兵%于可響%高月花%宋敏訓%牟建青%李峰
황병%우가향%고월화%송민훈%모건청%리봉
禽痘病毒%新城疫病毒%融合蛋白%位点特异性重组%绿色荧光蛋白
禽痘病毒%新城疫病毒%融閤蛋白%位點特異性重組%綠色熒光蛋白
금두병독%신성역병독%융합단백%위점특이성중조%록색형광단백
通过RT-PCR扩增新城疫病毒F基因,利用禽痘病毒复合启动子、SV40 PolyA终止信号序列构建F基因表达盒.将F基因表达盒与loxp-GFP-loxP序列串联插入禽痘病毒重组臂,构建了禽痘病毒转移质粒载体.在脂质体介导下转染CEF,获得了带有绿色荧光信号的重组病毒rFPVFGFP.通过二次转染,利用Cre-loxP位点特异性重组将重组病毒基因组的GFP自动去除,结果获得了只含新城疫病毒F基因表达盒的重组禽痘病毒rFPVF.试验结果表明,rFPVF复制稳定,表达的F蛋白具有免疫原性,能够刺激鸡只产生抗新城疫病毒的中和抗体.
通過RT-PCR擴增新城疫病毒F基因,利用禽痘病毒複閤啟動子、SV40 PolyA終止信號序列構建F基因錶達盒.將F基因錶達盒與loxp-GFP-loxP序列串聯插入禽痘病毒重組臂,構建瞭禽痘病毒轉移質粒載體.在脂質體介導下轉染CEF,穫得瞭帶有綠色熒光信號的重組病毒rFPVFGFP.通過二次轉染,利用Cre-loxP位點特異性重組將重組病毒基因組的GFP自動去除,結果穫得瞭隻含新城疫病毒F基因錶達盒的重組禽痘病毒rFPVF.試驗結果錶明,rFPVF複製穩定,錶達的F蛋白具有免疫原性,能夠刺激鷄隻產生抗新城疫病毒的中和抗體.
통과RT-PCR확증신성역병독F기인,이용금두병독복합계동자、SV40 PolyA종지신호서렬구건F기인표체합.장F기인표체합여loxp-GFP-loxP서렬천련삽입금두병독중조비,구건료금두병독전이질립재체.재지질체개도하전염CEF,획득료대유록색형광신호적중조병독rFPVFGFP.통과이차전염,이용Cre-loxP위점특이성중조장중조병독기인조적GFP자동거제,결과획득료지함신성역병독F기인표체합적중조금두병독rFPVF.시험결과표명,rFPVF복제은정,표체적F단백구유면역원성,능구자격계지산생항신성역병독적중화항체.
