中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2006年
3期
Ⅳ-Ⅵ
,共1页
张可浩%黄丽霞%傅玉才%章家新
張可浩%黃麗霞%傅玉纔%章傢新
장가호%황려하%부옥재%장가신
阴道毛滴虫%沉默信息调控因子2%同源基因%基因克隆%原核表达
陰道毛滴蟲%沉默信息調控因子2%同源基因%基因剋隆%原覈錶達
음도모적충%침묵신식조공인자2%동원기인%기인극륭%원핵표체
提取阴道毛滴虫(T.vaginalis)LX006细胞株传代培养细胞总RNA,RT-PCR扩增Tv-Sir2-like全长cDNA链,扩增产物连接到T-A克隆载体并转化大肠埃希菌(E.coli)JM109.提取重组克隆质粒,并用限制性内切酶EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ进行双酶切,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-41b,并在E.coli BL21中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果显示目的基因定向克隆于原核表达质粒pET-41b获得了表达重组子,IPTG诱导该原核表达载体在E.coli BL21中表达相对分子质量(Mr)约为59 000的重组融合蛋白,表达量占菌体总蛋白量的30%.
提取陰道毛滴蟲(T.vaginalis)LX006細胞株傳代培養細胞總RNA,RT-PCR擴增Tv-Sir2-like全長cDNA鏈,擴增產物連接到T-A剋隆載體併轉化大腸埃希菌(E.coli)JM109.提取重組剋隆質粒,併用限製性內切酶EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ進行雙酶切,將目的基因定嚮剋隆到原覈錶達載體pET-41b,併在E.coli BL21中經異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達.結果顯示目的基因定嚮剋隆于原覈錶達質粒pET-41b穫得瞭錶達重組子,IPTG誘導該原覈錶達載體在E.coli BL21中錶達相對分子質量(Mr)約為59 000的重組融閤蛋白,錶達量佔菌體總蛋白量的30%.
제취음도모적충(T.vaginalis)LX006세포주전대배양세포총RNA,RT-PCR확증Tv-Sir2-like전장cDNA련,확증산물련접도T-A극륭재체병전화대장애희균(E.coli)JM109.제취중조극륭질립,병용한제성내절매EcoR Ⅰ화Pst Ⅰ진행쌍매절,장목적기인정향극륭도원핵표체재체pET-41b,병재E.coli BL21중경이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체.결과현시목적기인정향극륭우원핵표체질립pET-41b획득료표체중조자,IPTG유도해원핵표체재체재E.coli BL21중표체상대분자질량(Mr)약위59 000적중조융합단백,표체량점균체총단백량적30%.
