华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
JOURNAL OF HUAZHONG UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(HEALTH SCIENCES)
2003年
3期
242-245
,共4页
蒋易%周李承%吴晓明%周宜开%雷于生%任恕
蔣易%週李承%吳曉明%週宜開%雷于生%任恕
장역%주리승%오효명%주의개%뢰우생%임서
核苷酸切除修复%DNA损伤修复能力%基因,XPD%反义RNA%药物敏感性
覈苷痠切除脩複%DNA損傷脩複能力%基因,XPD%反義RNA%藥物敏感性
핵감산절제수복%DNA손상수복능력%기인,XPD%반의RNA%약물민감성
目的构建核苷酸切除修复基因XPD反义RNA表达载体,初步探讨其对肺癌细胞DNA损伤修复能力及药物敏感性的影响.方法通过RT-PCR技术获取XPD cDNA(2~667 bp)片段并反向插入真核7表达载体反义载体pcDNA3.1,采用脂质体法将构建的载体质粒转染肺癌细胞株A549,经G418筛选,采用抗肿瘤药物阿霉素、顺铂对细胞进行染毒干预,干预结果采用SCGE和MTT综合判定.结果转染细胞XPD mRNA表达受到抑制.单细胞凝胶电泳显示转染细胞DNA损伤修复能力降低.MTT法显示转染细胞药物敏感性增高.结论XPD反义RNA能降低肺癌细胞DNA损伤修复能力,其为核苷酸切除修复功能的研究提供了一个新的方式.
目的構建覈苷痠切除脩複基因XPD反義RNA錶達載體,初步探討其對肺癌細胞DNA損傷脩複能力及藥物敏感性的影響.方法通過RT-PCR技術穫取XPD cDNA(2~667 bp)片段併反嚮插入真覈7錶達載體反義載體pcDNA3.1,採用脂質體法將構建的載體質粒轉染肺癌細胞株A549,經G418篩選,採用抗腫瘤藥物阿黴素、順鉑對細胞進行染毒榦預,榦預結果採用SCGE和MTT綜閤判定.結果轉染細胞XPD mRNA錶達受到抑製.單細胞凝膠電泳顯示轉染細胞DNA損傷脩複能力降低.MTT法顯示轉染細胞藥物敏感性增高.結論XPD反義RNA能降低肺癌細胞DNA損傷脩複能力,其為覈苷痠切除脩複功能的研究提供瞭一箇新的方式.
목적구건핵감산절제수복기인XPD반의RNA표체재체,초보탐토기대폐암세포DNA손상수복능력급약물민감성적영향.방법통과RT-PCR기술획취XPD cDNA(2~667 bp)편단병반향삽입진핵7표체재체반의재체pcDNA3.1,채용지질체법장구건적재체질립전염폐암세포주A549,경G418사선,채용항종류약물아매소、순박대세포진행염독간예,간예결과채용SCGE화MTT종합판정.결과전염세포XPD mRNA표체수도억제.단세포응효전영현시전염세포DNA손상수복능력강저.MTT법현시전염세포약물민감성증고.결론XPD반의RNA능강저폐암세포DNA손상수복능력,기위핵감산절제수복공능적연구제공료일개신적방식.