CAJ | 학술논문

目的探讨组胺对体外培养人角质形成细胞(HKC)增殖、凋亡和分化的影响及其机制.方法采用MTT法和蓝染色法检测组胺对HKC体外生长的影响,流式细胞仪检测细胞周期和细胞早期凋亡,细胞DNA梯度降解法检测凋亡,激光扫描共聚焦显微镜结合钙荧光探针技术检测HKC胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i),SABC免疫细胞化学法检测HKC分化标志物角蛋白10(K10)及内披蛋白表达.结果高浓度组胺抑制HKC生长,以10-4 mol/L抑制率最大(细胞存活率65.6%);低浓度组胺则促进HKC生长,以10-8mol/L作用显著(细胞存活率130.7%).10-4mol/L组胺致HKCG0/G1期比例增高30.97%,S期比例减少73.81%,抑制G1/S期转换,并明显促进细胞凋亡,早期凋亡率18.64%明显高于对照组(5.60%,P＜0.05).10-4mol/L组胺使HKC[Ca2+]i上升58.9%,H2组胺受体拮抗剂西咪替丁则使[Ca2+]i下降24.5%.10-4mol/L组胺下调HKC K10及内披蛋白表达,但与对照组无显著性差异(P＞0.05).结论高浓度组胺阻抑HKC细胞周期进程、诱导[Ca2+]i增加及其显著的促凋亡作用可能是使HKC体外生长受抑的部分机制.在生理条件下,组胺可能具有调节表皮组织更新的作用;在炎症、损伤等病理条件下,大量的组胺可能抑制表皮的再生和KC的分化.
목적탐토조알대체외배양인각질형성세포(HKC)증식、조망화분화적영향급기궤제.방법채용MTT법화람염색법검측조알대HKC체외생장적영향,류식세포의검측세포주기화세포조기조망,세포DNA제도강해법검측조망,격광소묘공취초현미경결합개형광탐침기술검측HKC포내유리Ca2+농도([Ca2+]i),SABC면역세포화학법검측HKC분화표지물각단백10(K10)급내피단백표체.결과고농도조알억제HKC생장,이10-4 mol/L억제솔최대(세포존활솔65.6%);저농도조알칙촉진HKC생장,이10-8mol/L작용현저(세포존활솔130.7%).10-4mol/L조알치HKCG0/G1기비례증고30.97%,S기비례감소73.81%,억제G1/S기전환,병명현촉진세포조망,조기조망솔18.64%명현고우대조조(5.60%,P＜0.05).10-4mol/L조알사HKC[Ca2+]i상승58.9%,H2조알수체길항제서미체정칙사[Ca2+]i하강24.5%.10-4mol/L조알하조HKC K10급내피단백표체,단여대조조무현저성차이(P＞0.05).결론고농도조알조억HKC세포주기진정、유도[Ca2+]i증가급기현저적촉조망작용가능시사HKC체외생장수억적부분궤제.재생리조건하,조알가능구유조절표피조직경신적작용;재염증、손상등병리조건하,대량적조알가능억제표피적재생화KC적분화.