中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2006年
12期
1132-1136
,共5页
王京%汪立%范慧%张颖妹%王露
王京%汪立%範慧%張穎妹%王露
왕경%왕립%범혜%장영매%왕로
CMTM1-v17%基因重组%融合表达%多克隆抗体
CMTM1-v17%基因重組%融閤錶達%多剋隆抗體
CMTM1-v17%기인중조%융합표체%다극륭항체
目的:CMTM1-V17是我室克隆的人类新基因,为进一步研究CMTM1-v17的功能,需制备高纯度的CMTM1-v17的抗体.方法:根据生物信息学分析的结果,用PCR法扩增人CMTM1-v17分子C端的cDNA片段(编码118～149位氨基酸),亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX-4T-2上.将重组质粒pGST-CMTM1-v17导入大肠杆菌BL21,诱导表达GST-CMTM1-v17 C端融合蛋白,经GST亲合层析、凝血酶切割后获得CMTM1-v17 C蛋白作为抗原免疫家兔制备抗血清.抗血清经抗原亲合层析后用Western blot和免疫组化方法进行鉴定.结果:通过重组表达获得抗原蛋白,免疫家兔并纯化抗血清得到特异的抗CMTM1-v17抗体,该抗体能检测到CMTM1-v17超表达和细胞内源性的蛋白.结论:成功制备了抗CMTM1-v17的多克隆抗体,对进一步研究CMTM1-v17的功能提供了一个有用的工具.
目的:CMTM1-V17是我室剋隆的人類新基因,為進一步研究CMTM1-v17的功能,需製備高純度的CMTM1-v17的抗體.方法:根據生物信息學分析的結果,用PCR法擴增人CMTM1-v17分子C耑的cDNA片段(編碼118～149位氨基痠),亞剋隆到GST融閤蛋白錶達載體pGEX-4T-2上.將重組質粒pGST-CMTM1-v17導入大腸桿菌BL21,誘導錶達GST-CMTM1-v17 C耑融閤蛋白,經GST親閤層析、凝血酶切割後穫得CMTM1-v17 C蛋白作為抗原免疫傢兔製備抗血清.抗血清經抗原親閤層析後用Western blot和免疫組化方法進行鑒定.結果:通過重組錶達穫得抗原蛋白,免疫傢兔併純化抗血清得到特異的抗CMTM1-v17抗體,該抗體能檢測到CMTM1-v17超錶達和細胞內源性的蛋白.結論:成功製備瞭抗CMTM1-v17的多剋隆抗體,對進一步研究CMTM1-v17的功能提供瞭一箇有用的工具.
목적:CMTM1-V17시아실극륭적인류신기인,위진일보연구CMTM1-v17적공능,수제비고순도적CMTM1-v17적항체.방법:근거생물신식학분석적결과,용PCR법확증인CMTM1-v17분자C단적cDNA편단(편마118～149위안기산),아극륭도GST융합단백표체재체pGEX-4T-2상.장중조질립pGST-CMTM1-v17도입대장간균BL21,유도표체GST-CMTM1-v17 C단융합단백,경GST친합층석、응혈매절할후획득CMTM1-v17 C단백작위항원면역가토제비항혈청.항혈청경항원친합층석후용Western blot화면역조화방법진행감정.결과:통과중조표체획득항원단백,면역가토병순화항혈청득도특이적항CMTM1-v17항체,해항체능검측도CMTM1-v17초표체화세포내원성적단백.결론:성공제비료항CMTM1-v17적다극륭항체,대진일보연구CMTM1-v17적공능제공료일개유용적공구.
