生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
4期
690-694
,共5页
刘惠莉%邢继兰%潘洁%杨秋峰%赵艳敏
劉惠莉%邢繼蘭%潘潔%楊鞦峰%趙豔敏
류혜리%형계란%반길%양추봉%조염민
猪流感病毒%抗原表位%新型疫苗
豬流感病毒%抗原錶位%新型疫苗
저류감병독%항원표위%신형역묘
根据猪流感病毒血凝素蛋白基因(Heamuglutinine,HA)的核苷酸序列,设计、筛选HA蛋白氨基酸序列的主要表位多肽4个,将4个片段以柔性连接串联成模拟蛋白,核苷酸约为300 bp,体外扩增该模拟蛋白基因,插入到原核表达载体pET30a(+)中,转染宿主菌诱导表达,结果获得分子量为20kD的表达蛋白,该蛋白可与抗His-tag抗体,抗猪流感病毒H1N1、H3N2亚型高免血清发生免疫学反应.纯化后免疫小鼠,ELISA及血凝抑制(Heamuglutinine inhibitor,HI)试验检测.小鼠产生针对多肽抗原的血清抗体,同时还可检测到H1N1,H3N2亚型SIV血凝抗体.流氏细胞仪检测免疫组外周血淋巴细胞高于对照组,说明该模拟蛋白具有与H1N1、H3N2亚型猪流感病毒相似的免疫原性及反应原性,为H1N1、H3N2血清亚型猪流感病毒疫苗研制提供了新手段.
根據豬流感病毒血凝素蛋白基因(Heamuglutinine,HA)的覈苷痠序列,設計、篩選HA蛋白氨基痠序列的主要錶位多肽4箇,將4箇片段以柔性連接串聯成模擬蛋白,覈苷痠約為300 bp,體外擴增該模擬蛋白基因,插入到原覈錶達載體pET30a(+)中,轉染宿主菌誘導錶達,結果穫得分子量為20kD的錶達蛋白,該蛋白可與抗His-tag抗體,抗豬流感病毒H1N1、H3N2亞型高免血清髮生免疫學反應.純化後免疫小鼠,ELISA及血凝抑製(Heamuglutinine inhibitor,HI)試驗檢測.小鼠產生針對多肽抗原的血清抗體,同時還可檢測到H1N1,H3N2亞型SIV血凝抗體.流氏細胞儀檢測免疫組外週血淋巴細胞高于對照組,說明該模擬蛋白具有與H1N1、H3N2亞型豬流感病毒相似的免疫原性及反應原性,為H1N1、H3N2血清亞型豬流感病毒疫苗研製提供瞭新手段.
근거저류감병독혈응소단백기인(Heamuglutinine,HA)적핵감산서렬,설계、사선HA단백안기산서렬적주요표위다태4개,장4개편단이유성련접천련성모의단백,핵감산약위300 bp,체외확증해모의단백기인,삽입도원핵표체재체pET30a(+)중,전염숙주균유도표체,결과획득분자량위20kD적표체단백,해단백가여항His-tag항체,항저류감병독H1N1、H3N2아형고면혈청발생면역학반응.순화후면역소서,ELISA급혈응억제(Heamuglutinine inhibitor,HI)시험검측.소서산생침대다태항원적혈청항체,동시환가검측도H1N1,H3N2아형SIV혈응항체.류씨세포의검측면역조외주혈림파세포고우대조조,설명해모의단백구유여H1N1、H3N2아형저류감병독상사적면역원성급반응원성,위H1N1、H3N2혈청아형저류감병독역묘연제제공료신수단.
