微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2008年
6期
846-850
,共5页
李成付%李凯%李加友%焦庆才%刘茜%易立涛
李成付%李凱%李加友%焦慶纔%劉茜%易立濤
리성부%리개%리가우%초경재%류천%역립도
粪肠球菌NJ402%精氨酸脱亚胺酶%分离纯化%酶学性质
糞腸毬菌NJ402%精氨痠脫亞胺酶%分離純化%酶學性質
분장구균NJ402%정안산탈아알매%분리순화%매학성질
经硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、SephadexG-75凝胶柱层析从NJ402自溶细胞超声破碎液中提纯得到精氨酸脱亚胺酶(ADI),纯化倍数为34.5,活力回收率为31.4%,经SDS-PAGE以及Native-PAGE测定结果表明,ADI亚基分子量约为46 kD,该酶非变性情况下的分子量约为190 kD左右,该酶为同四聚体结构.酶学,胜质研究结果表明:ADI催化最适温度和最适pH分别为50℃和6.5,在45℃以下和pH 5～8之间有很好的稳定性.ADI是L-型脱亚胺酶,具有严格的光学选择性,适当浓度的Mn2+、Mg2+、Co2+对ADI催化活力的促进作用较大,高浓度的Zn2+和Co2+对酶有一定程度的抑制作用,L-瓜氨酸对酶无抑制作用而L-鸟氨酸却表现出较强的抑制作用.ADI在最佳催化条件下作用于L-精氨酸的米氏常数为3.2686 mmol/L,最大反应速度为2.44 μmol/min.
經硫痠銨分級沉澱、Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析、SephadexG-75凝膠柱層析從NJ402自溶細胞超聲破碎液中提純得到精氨痠脫亞胺酶(ADI),純化倍數為34.5,活力迴收率為31.4%,經SDS-PAGE以及Native-PAGE測定結果錶明,ADI亞基分子量約為46 kD,該酶非變性情況下的分子量約為190 kD左右,該酶為同四聚體結構.酶學,勝質研究結果錶明:ADI催化最適溫度和最適pH分彆為50℃和6.5,在45℃以下和pH 5～8之間有很好的穩定性.ADI是L-型脫亞胺酶,具有嚴格的光學選擇性,適噹濃度的Mn2+、Mg2+、Co2+對ADI催化活力的促進作用較大,高濃度的Zn2+和Co2+對酶有一定程度的抑製作用,L-瓜氨痠對酶無抑製作用而L-鳥氨痠卻錶現齣較彊的抑製作用.ADI在最佳催化條件下作用于L-精氨痠的米氏常數為3.2686 mmol/L,最大反應速度為2.44 μmol/min.
경류산안분급침정、Q-Sepharose Fast Flow음리자교환층석、SephadexG-75응효주층석종NJ402자용세포초성파쇄액중제순득도정안산탈아알매(ADI),순화배수위34.5,활력회수솔위31.4%,경SDS-PAGE이급Native-PAGE측정결과표명,ADI아기분자량약위46 kD,해매비변성정황하적분자량약위190 kD좌우,해매위동사취체결구.매학,성질연구결과표명:ADI최화최괄온도화최괄pH분별위50℃화6.5,재45℃이하화pH 5～8지간유흔호적은정성.ADI시L-형탈아알매,구유엄격적광학선택성,괄당농도적Mn2+、Mg2+、Co2+대ADI최화활력적촉진작용교대,고농도적Zn2+화Co2+대매유일정정도적억제작용,L-과안산대매무억제작용이L-조안산각표현출교강적억제작용.ADI재최가최화조건하작용우L-정안산적미씨상수위3.2686 mmol/L,최대반응속도위2.44 μmol/min.
