中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2009年
3期
74-79
,共6页
马细兰%易诗白%张勇%李云%黄卫人%刘晓春%林浩然
馬細蘭%易詩白%張勇%李雲%黃衛人%劉曉春%林浩然
마세란%역시백%장용%리운%황위인%류효춘%림호연
尼罗罗非鱼%荧光实时定量PCR%GH%GHR%IGF-I%发育性变化
尼囉囉非魚%熒光實時定量PCR%GH%GHR%IGF-I%髮育性變化
니라라비어%형광실시정량PCR%GH%GHR%IGF-I%발육성변화
为了准确分析尼罗罗非鱼生长激素(growth hormone , GH)、生长激素受体(growth hormone receptors, GHRs)和胰岛素样生长因子I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)在早期发育阶段的作用,实验设计了尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-I基因的特异性引物,提取垂体或肝脏总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了GH、GHR、IGF-I基因荧光实时定量PCR检测方法.运用建立的荧光实时定量 PCR检测了尼罗罗非鱼GH、GHR和IGF-I基因表达的发育性变化.结果表明在早期发育阶段,尼罗罗非鱼GH 与 IGF-I,GHR1与 GHR2的mRNA表达存在一定的互补关系;GH的表达与GHR1的表达呈显著正相关,提示GH与IGF-I,GHR1与GHR2在尼罗罗非鱼早期发育的不同阶段起主导作用,且GH可能主要通过与GHR1的结合起作用.
為瞭準確分析尼囉囉非魚生長激素(growth hormone , GH)、生長激素受體(growth hormone receptors, GHRs)和胰島素樣生長因子I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)在早期髮育階段的作用,實驗設計瞭尼囉囉非魚GH、GHR、IGF-I基因的特異性引物,提取垂體或肝髒總RNA併擴增齣目的片段,將PCR產物剋隆到pGEM-T Easy載體,經質粒PCR擴增、酶切和測序鑒定重組質粒,構建標準麯線等,成功建立瞭GH、GHR、IGF-I基因熒光實時定量PCR檢測方法.運用建立的熒光實時定量 PCR檢測瞭尼囉囉非魚GH、GHR和IGF-I基因錶達的髮育性變化.結果錶明在早期髮育階段,尼囉囉非魚GH 與 IGF-I,GHR1與 GHR2的mRNA錶達存在一定的互補關繫;GH的錶達與GHR1的錶達呈顯著正相關,提示GH與IGF-I,GHR1與GHR2在尼囉囉非魚早期髮育的不同階段起主導作用,且GH可能主要通過與GHR1的結閤起作用.
위료준학분석니라라비어생장격소(growth hormone , GH)、생장격소수체(growth hormone receptors, GHRs)화이도소양생장인자I(Insulin-like growth factor-I,IGF-I)재조기발육계단적작용,실험설계료니라라비어GH、GHR、IGF-I기인적특이성인물,제취수체혹간장총RNA병확증출목적편단,장PCR산물극륭도pGEM-T Easy재체,경질립PCR확증、매절화측서감정중조질립,구건표준곡선등,성공건립료GH、GHR、IGF-I기인형광실시정량PCR검측방법.운용건립적형광실시정량 PCR검측료니라라비어GH、GHR화IGF-I기인표체적발육성변화.결과표명재조기발육계단,니라라비어GH 여 IGF-I,GHR1여 GHR2적mRNA표체존재일정적호보관계;GH적표체여GHR1적표체정현저정상관,제시GH여IGF-I,GHR1여GHR2재니라라비어조기발육적불동계단기주도작용,차GH가능주요통과여GHR1적결합기작용.
