实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2010年
3期
355-357
,共3页
肝炎病毒属%RNA聚合酶%HepG-2细胞%表达%活性
肝炎病毒屬%RNA聚閤酶%HepG-2細胞%錶達%活性
간염병독속%RNA취합매%HepG-2세포%표체%활성
目的:探讨丙型肝炎病毒RNA聚合酶(NS5B)在肝癌细胞株HepG-2的稳定表达与活性.方法:Sca I酶切合有丙型肝炎病毒NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,线性化的pcDNA-5B通过脂质体介导转染HepG-2细胞,G418筛选转染细胞.阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验鉴定稳定表达NS5B蛋白的RNA聚合酶活性.结果:NS5B基因可整合到转染的HepG-2细胞的染色体上,并能有效转录和表达.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验表明稳定表达的NS5B在体外和细胞内均具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.结论:肝细胞HepG-2可以稳定表达丙型肝炎病毒NS5B,且具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.
目的:探討丙型肝炎病毒RNA聚閤酶(NS5B)在肝癌細胞株HepG-2的穩定錶達與活性.方法:Sca I酶切閤有丙型肝炎病毒NS5B基因的重組錶達載體pcDNA-5B,線性化的pcDNA-5B通過脂質體介導轉染HepG-2細胞,G418篩選轉染細胞.暘性細胞經基因組PCR、RT-PCR和Western Blot鑒定.體外RNA聚閤酶試驗和熒光素酶試驗鑒定穩定錶達NS5B蛋白的RNA聚閤酶活性.結果:NS5B基因可整閤到轉染的HepG-2細胞的染色體上,併能有效轉錄和錶達.體外RNA聚閤酶試驗和熒光素酶試驗錶明穩定錶達的NS5B在體外和細胞內均具備RNA依賴的RNA聚閤酶活性.結論:肝細胞HepG-2可以穩定錶達丙型肝炎病毒NS5B,且具備RNA依賴的RNA聚閤酶活性.
목적:탐토병형간염병독RNA취합매(NS5B)재간암세포주HepG-2적은정표체여활성.방법:Sca I매절합유병형간염병독NS5B기인적중조표체재체pcDNA-5B,선성화적pcDNA-5B통과지질체개도전염HepG-2세포,G418사선전염세포.양성세포경기인조PCR、RT-PCR화Western Blot감정.체외RNA취합매시험화형광소매시험감정은정표체NS5B단백적RNA취합매활성.결과:NS5B기인가정합도전염적HepG-2세포적염색체상,병능유효전록화표체.체외RNA취합매시험화형광소매시험표명은정표체적NS5B재체외화세포내균구비RNA의뢰적RNA취합매활성.결론:간세포HepG-2가이은정표체병형간염병독NS5B,차구비RNA의뢰적RNA취합매활성.
