中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
38期
7041-7044
,共4页
关节软骨细胞%骨髓间充质干细胞%Transwell共培养%软骨样诱导%氨基聚糖
關節軟骨細胞%骨髓間充質榦細胞%Transwell共培養%軟骨樣誘導%氨基聚糖
관절연골세포%골수간충질간세포%Transwell공배양%연골양유도%안기취당
背景:研究证实,关节软骨细胞具有分泌诱导因子促进骨髓间充质干细胞向关节软骨细胞分化的能力,但至今未见两种细胞运用Transwell共培养诱导骨髓间充质干细胞形成软骨的报道.目的:观察在Transwell共培养系统中共培养后,关节软骨细胞诱导骨髓间充质干细胞向关节软骨样细胞转化的能力.方法:骨髓间充质干细胞来源于4周龄SD大鼠的股骨及胫骨干骨髓,关节软骨细胞来源于4周龄SD大鼠的正常股骨头表面的关节软骨.分别吸取第3代骨髓间充质干细胞和关节软骨细胞,按1:1的细胞比例分别植于Transwell共培养系统中,下室植入骨髓间充质干细胞,上室植入关节软骨细胞.同时设置相同浓度单纯骨髓间充质干细胞对照组,分别在含胎牛血清的DMEM培养基中培养,相差显微镜下观察细胞的增殖和基质合成情况,并对各组细胞爬片进行Ⅱ型胶原免疫组化染色及氨基聚糖含量检测.结果与结论:共培养组骨髓间充质干细胞数量增多,细胞外基质合成丰富,其基质能被Ⅱ型胶原免疫组化染色,细胞染色呈现黄色.氨基聚糖含量随着诱导时间增加而增多.提示关节软骨细胞分泌物具有促进骨髓间充质干细胞向关节软骨样细胞转化的能力,与此同时,骨髓间充质干细胞还能分泌促进组织细胞修复的细胞因子,使共培养中的软骨细胞功能得以加强.由此可见,软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养诱导具有独特的优势.
揹景:研究證實,關節軟骨細胞具有分泌誘導因子促進骨髓間充質榦細胞嚮關節軟骨細胞分化的能力,但至今未見兩種細胞運用Transwell共培養誘導骨髓間充質榦細胞形成軟骨的報道.目的:觀察在Transwell共培養繫統中共培養後,關節軟骨細胞誘導骨髓間充質榦細胞嚮關節軟骨樣細胞轉化的能力.方法:骨髓間充質榦細胞來源于4週齡SD大鼠的股骨及脛骨榦骨髓,關節軟骨細胞來源于4週齡SD大鼠的正常股骨頭錶麵的關節軟骨.分彆吸取第3代骨髓間充質榦細胞和關節軟骨細胞,按1:1的細胞比例分彆植于Transwell共培養繫統中,下室植入骨髓間充質榦細胞,上室植入關節軟骨細胞.同時設置相同濃度單純骨髓間充質榦細胞對照組,分彆在含胎牛血清的DMEM培養基中培養,相差顯微鏡下觀察細胞的增殖和基質閤成情況,併對各組細胞爬片進行Ⅱ型膠原免疫組化染色及氨基聚糖含量檢測.結果與結論:共培養組骨髓間充質榦細胞數量增多,細胞外基質閤成豐富,其基質能被Ⅱ型膠原免疫組化染色,細胞染色呈現黃色.氨基聚糖含量隨著誘導時間增加而增多.提示關節軟骨細胞分泌物具有促進骨髓間充質榦細胞嚮關節軟骨樣細胞轉化的能力,與此同時,骨髓間充質榦細胞還能分泌促進組織細胞脩複的細胞因子,使共培養中的軟骨細胞功能得以加彊.由此可見,軟骨細胞與骨髓間充質榦細胞共培養誘導具有獨特的優勢.
배경:연구증실,관절연골세포구유분비유도인자촉진골수간충질간세포향관절연골세포분화적능력,단지금미견량충세포운용Transwell공배양유도골수간충질간세포형성연골적보도.목적:관찰재Transwell공배양계통중공배양후,관절연골세포유도골수간충질간세포향관절연골양세포전화적능력.방법:골수간충질간세포래원우4주령SD대서적고골급경골간골수,관절연골세포래원우4주령SD대서적정상고골두표면적관절연골.분별흡취제3대골수간충질간세포화관절연골세포,안1:1적세포비례분별식우Transwell공배양계통중,하실식입골수간충질간세포,상실식입관절연골세포.동시설치상동농도단순골수간충질간세포대조조,분별재함태우혈청적DMEM배양기중배양,상차현미경하관찰세포적증식화기질합성정황,병대각조세포파편진행Ⅱ형효원면역조화염색급안기취당함량검측.결과여결론:공배양조골수간충질간세포수량증다,세포외기질합성봉부,기기질능피Ⅱ형효원면역조화염색,세포염색정현황색.안기취당함량수착유도시간증가이증다.제시관절연골세포분비물구유촉진골수간충질간세포향관절연골양세포전화적능력,여차동시,골수간충질간세포환능분비촉진조직세포수복적세포인자,사공배양중적연골세포공능득이가강.유차가견,연골세포여골수간충질간세포공배양유도구유독특적우세.