北京农学院学报
北京農學院學報
북경농학원학보
JOURNAL OF BEIJING AGRICULTURAL COLLEGE
2011年
4期
7-10
,共4页
张利义%张彩霞%康国栋%田义%王强%丛佩华%CONG Pei-hua
張利義%張綵霞%康國棟%田義%王彊%叢珮華%CONG Pei-hua
장리의%장채하%강국동%전의%왕강%총패화%CONG Pei-hua
苹果%cDNA文库%CHS基因%载体构建
蘋果%cDNA文庫%CHS基因%載體構建
평과%cDNA문고%CHS기인%재체구건
为了理解苹果类黄酮代谢的分子机制,以富含类黄酮‘变叶海棠,苹果幼叶为材料,利用SMART法构建一个苹果叶片全长cDNA文库.初级文库滴度为2.28×104 cfu/mL,库容为3.30×106个独立克隆,重组率100％,插入片段平均长度大于1.5 kb.并对随机取16个重组子进行测序,经分析完整全长cDNA为7条.并从测序中获得一个查尔酮合酶(Chalcone sythase,CHS)基因,该基因cDNA全长1548 bp,有一个1170 bp的开放阅读框,编码含389个氨基酸残基的蛋白,蛋白的理论分子质量为42.44 KDa,等电点5.65,该基因与已知苹果CHS基因高度同源.并构建该基因植物表达载体,用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105.
為瞭理解蘋果類黃酮代謝的分子機製,以富含類黃酮‘變葉海棠,蘋果幼葉為材料,利用SMART法構建一箇蘋果葉片全長cDNA文庫.初級文庫滴度為2.28×104 cfu/mL,庫容為3.30×106箇獨立剋隆,重組率100％,插入片段平均長度大于1.5 kb.併對隨機取16箇重組子進行測序,經分析完整全長cDNA為7條.併從測序中穫得一箇查爾酮閤酶(Chalcone sythase,CHS)基因,該基因cDNA全長1548 bp,有一箇1170 bp的開放閱讀框,編碼含389箇氨基痠殘基的蛋白,蛋白的理論分子質量為42.44 KDa,等電點5.65,該基因與已知蘋果CHS基因高度同源.併構建該基因植物錶達載體,用凍融法將其導入根癌農桿菌EHA105.
위료리해평과류황동대사적분자궤제,이부함류황동‘변협해당,평과유협위재료,이용SMART법구건일개평과협편전장cDNA문고.초급문고적도위2.28×104 cfu/mL,고용위3.30×106개독립극륭,중조솔100％,삽입편단평균장도대우1.5 kb.병대수궤취16개중조자진행측서,경분석완정전장cDNA위7조.병종측서중획득일개사이동합매(Chalcone sythase,CHS)기인,해기인cDNA전장1548 bp,유일개1170 bp적개방열독광,편마함389개안기산잔기적단백,단백적이론분자질량위42.44 KDa,등전점5.65,해기인여이지평과CHS기인고도동원.병구건해기인식물표체재체,용동융법장기도입근암농간균EHA105.
