安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2012年
11期
1278-1282
,共5页
储著朗%崔笑%杨晓明%汪思应
儲著朗%崔笑%楊曉明%汪思應
저저랑%최소%양효명%왕사응
肝细胞生成素205%COX6B1%蛋白质相互作用
肝細胞生成素205%COX6B1%蛋白質相互作用
간세포생성소205%COX6B1%단백질상호작용
目的 以酵母双杂交(Y2H) 和GST融合蛋白沉降技术(GST-Pull down)来探讨肝细胞生成素205 (HPO205) 与细胞色素C氧化酶(COX)6B1间存在的相互作用,为研究HPO205的功能提供依据.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增HPO205和COX6B1的编码基因,分别构建至pDBLeu 和pPC86的重组Y2H 质粒载体.然后将二者的重组质粒共转染酵母MaV203进行Y2H鉴定,并用GST-Pull down 技术对其验证.结果 成功克隆HPO205和COX6B1编码基因至Y2H载体和相应表达载体.经过Y2H 鉴定发现,pDBLeu-GRER 和pPC86-COX6B1共转后能激活Ura、LacZ、His 3个报告基因;GST-Pull down 实验显示,GST-COX6B1能沉淀HPO205.结论 HPO205可能通过与COX6B1相互作用影响线粒体氧化磷酸化过程.
目的 以酵母雙雜交(Y2H) 和GST融閤蛋白沉降技術(GST-Pull down)來探討肝細胞生成素205 (HPO205) 與細胞色素C氧化酶(COX)6B1間存在的相互作用,為研究HPO205的功能提供依據.方法 聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增HPO205和COX6B1的編碼基因,分彆構建至pDBLeu 和pPC86的重組Y2H 質粒載體.然後將二者的重組質粒共轉染酵母MaV203進行Y2H鑒定,併用GST-Pull down 技術對其驗證.結果 成功剋隆HPO205和COX6B1編碼基因至Y2H載體和相應錶達載體.經過Y2H 鑒定髮現,pDBLeu-GRER 和pPC86-COX6B1共轉後能激活Ura、LacZ、His 3箇報告基因;GST-Pull down 實驗顯示,GST-COX6B1能沉澱HPO205.結論 HPO205可能通過與COX6B1相互作用影響線粒體氧化燐痠化過程.
목적 이효모쌍잡교(Y2H) 화GST융합단백침강기술(GST-Pull down)래탐토간세포생성소205 (HPO205) 여세포색소C양화매(COX)6B1간존재적상호작용,위연구HPO205적공능제공의거.방법 취합매련식반응(PCR)확증HPO205화COX6B1적편마기인,분별구건지pDBLeu 화pPC86적중조Y2H 질립재체.연후장이자적중조질립공전염효모MaV203진행Y2H감정,병용GST-Pull down 기술대기험증.결과 성공극륭HPO205화COX6B1편마기인지Y2H재체화상응표체재체.경과Y2H 감정발현,pDBLeu-GRER 화pPC86-COX6B1공전후능격활Ura、LacZ、His 3개보고기인;GST-Pull down 실험현시,GST-COX6B1능침정HPO205.결론 HPO205가능통과여COX6B1상호작용영향선립체양화린산화과정.
