中华麻醉学杂志
中華痳醉學雜誌
중화마취학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANESTHESIOLOGY
2007年
1期
62-65
,共4页
李洪%肖颖彬%杨天德%黄河%方国兴
李洪%肖穎彬%楊天德%黃河%方國興
리홍%초영빈%양천덕%황하%방국흥
活性氧%心肌再灌注损伤%二氮嗪%细胞,培养的
活性氧%心肌再灌註損傷%二氮嗪%細胞,培養的
활성양%심기재관주손상%이담진%세포,배양적
目的 探讨活性氧(ROS)在线粒体KATP(Mito-KATP)通道特异性开放剂二氮嗪预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用及其机制.方法 培养的成年大鼠心室肌细胞,随机分为5组:对照组、缺氧复氧组、二氮嗪预处理+缺氧复氧组、二氮嗪+ROS清除剂2-硫基丙酰氨基乙酸(MPG)预处理+缺氧复氧组、二氮嗪+蛋白激酶C特异性抑制剂氯化白屈菜赤碱预处理+缺氧复氧组.对照组常规培养;缺氧复氧组缺氧30 min复氧40 min;其余各组则加入相应的药物预处理10 min,二氮嗪、MPG、氯化白屈菜赤碱的终浓度分别为200、400、2 μmol·L-1,更换无血清培养基培养20 min,然后缺氧30 min复氧40 min.采用MTY法、CK检测试剂、Na+-K+-ATPase活性检测试剂和Western blot等方法分别检测心肌细胞的活力、CK活性、Na+-K+-ATPase活性、细胞浆和细胞膜PKCε表达情况,计算细胞膜PKCε表达百分比.结果 缺氧复氧可导致心肌细胞存活率及Na+-K+-ATPase活性降低,CK活性升高;二氮嗪预处理能增加细胞存活率及Na+-K+-ATPase活性,降低CK活性,增加细胞膜PKCε表达百分比;MPG抑制了二氮嗪预处理的心肌保护作用,并且在一定程度上抑制了PKCε的转位;CH可完全阻滞PKCε的转位,并且可降低二氮嗪预处理的心肌保护作用.结论 Mito-KATP通道开放后释放的ROS参与了二氮嗪预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤,其机制与PKCε的转位激活有关.
目的 探討活性氧(ROS)在線粒體KATP(Mito-KATP)通道特異性開放劑二氮嗪預處理減輕大鼠心肌細胞缺氧複氧損傷中的作用及其機製.方法 培養的成年大鼠心室肌細胞,隨機分為5組:對照組、缺氧複氧組、二氮嗪預處理+缺氧複氧組、二氮嗪+ROS清除劑2-硫基丙酰氨基乙痠(MPG)預處理+缺氧複氧組、二氮嗪+蛋白激酶C特異性抑製劑氯化白屈菜赤堿預處理+缺氧複氧組.對照組常規培養;缺氧複氧組缺氧30 min複氧40 min;其餘各組則加入相應的藥物預處理10 min,二氮嗪、MPG、氯化白屈菜赤堿的終濃度分彆為200、400、2 μmol·L-1,更換無血清培養基培養20 min,然後缺氧30 min複氧40 min.採用MTY法、CK檢測試劑、Na+-K+-ATPase活性檢測試劑和Western blot等方法分彆檢測心肌細胞的活力、CK活性、Na+-K+-ATPase活性、細胞漿和細胞膜PKCε錶達情況,計算細胞膜PKCε錶達百分比.結果 缺氧複氧可導緻心肌細胞存活率及Na+-K+-ATPase活性降低,CK活性升高;二氮嗪預處理能增加細胞存活率及Na+-K+-ATPase活性,降低CK活性,增加細胞膜PKCε錶達百分比;MPG抑製瞭二氮嗪預處理的心肌保護作用,併且在一定程度上抑製瞭PKCε的轉位;CH可完全阻滯PKCε的轉位,併且可降低二氮嗪預處理的心肌保護作用.結論 Mito-KATP通道開放後釋放的ROS參與瞭二氮嗪預處理減輕大鼠心肌細胞缺氧複氧損傷,其機製與PKCε的轉位激活有關.
목적 탐토활성양(ROS)재선립체KATP(Mito-KATP)통도특이성개방제이담진예처리감경대서심기세포결양복양손상중적작용급기궤제.방법 배양적성년대서심실기세포,수궤분위5조:대조조、결양복양조、이담진예처리+결양복양조、이담진+ROS청제제2-류기병선안기을산(MPG)예처리+결양복양조、이담진+단백격매C특이성억제제록화백굴채적감예처리+결양복양조.대조조상규배양;결양복양조결양30 min복양40 min;기여각조칙가입상응적약물예처리10 min,이담진、MPG、록화백굴채적감적종농도분별위200、400、2 μmol·L-1,경환무혈청배양기배양20 min,연후결양30 min복양40 min.채용MTY법、CK검측시제、Na+-K+-ATPase활성검측시제화Western blot등방법분별검측심기세포적활력、CK활성、Na+-K+-ATPase활성、세포장화세포막PKCε표체정황,계산세포막PKCε표체백분비.결과 결양복양가도치심기세포존활솔급Na+-K+-ATPase활성강저,CK활성승고;이담진예처리능증가세포존활솔급Na+-K+-ATPase활성,강저CK활성,증가세포막PKCε표체백분비;MPG억제료이담진예처리적심기보호작용,병차재일정정도상억제료PKCε적전위;CH가완전조체PKCε적전위,병차가강저이담진예처리적심기보호작용.결론 Mito-KATP통도개방후석방적ROS삼여료이담진예처리감경대서심기세포결양복양손상,기궤제여PKCε적전위격활유관.