中华创伤骨科杂志
中華創傷骨科雜誌
중화창상골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDIC TRAUMA
2007年
12期
1161-1164
,共4页
林建华%邓凌霄%吴朝阳%陈雷
林建華%鄧凌霄%吳朝暘%陳雷
림건화%산릉소%오조양%진뢰
软骨%增殖%周期蛋白%生长物质
軟骨%增殖%週期蛋白%生長物質
연골%증식%주기단백%생장물질
目的 探讨鹿茸多肽(PAP)促进软骨细胞增殖的机制.方法 以12.5、25.0、50.0、100.0 μg/mL不同浓度的PAP刺激软骨细胞,倒置相差显微镜观察软骨细胞生长情况,噻唑兰法(MTT)检测软骨细胞的生长增殖能力;以6、12、24、48 μg/mL不同浓度酪氨酸受体激酶阻断剂Genistein作用于受PAP刺激的软骨细胞,用MTT和流式细胞仪观察Genistein对PAP作用的影响;免疫组化SABC法检测核增殖抗原cyclinA在PAP和PAP+Genistein作用下的表达变化,RT-PCR法检测c-fos mRNA表达.结果 PAP作用下c-fos mRNA与cyclinA表达增加,S期的细胞比例增高,从6.4%增加到35.2%;Genistein作用后PAP的促增殖作用受到明显的抑制,S期的细胞降到4%,c-fos mRNA与cyclinA表达亦减少;单纯用Genistein不影响软骨细胞生长.结论 PAP可能通过酪氨酸受体蛋白激酶介导,作用下游的信号,引发立早基因c-fos表达,促进cyclinA的表达,引起更多的细胞进入有丝分裂期,从而促进软骨细胞增殖.
目的 探討鹿茸多肽(PAP)促進軟骨細胞增殖的機製.方法 以12.5、25.0、50.0、100.0 μg/mL不同濃度的PAP刺激軟骨細胞,倒置相差顯微鏡觀察軟骨細胞生長情況,噻唑蘭法(MTT)檢測軟骨細胞的生長增殖能力;以6、12、24、48 μg/mL不同濃度酪氨痠受體激酶阻斷劑Genistein作用于受PAP刺激的軟骨細胞,用MTT和流式細胞儀觀察Genistein對PAP作用的影響;免疫組化SABC法檢測覈增殖抗原cyclinA在PAP和PAP+Genistein作用下的錶達變化,RT-PCR法檢測c-fos mRNA錶達.結果 PAP作用下c-fos mRNA與cyclinA錶達增加,S期的細胞比例增高,從6.4%增加到35.2%;Genistein作用後PAP的促增殖作用受到明顯的抑製,S期的細胞降到4%,c-fos mRNA與cyclinA錶達亦減少;單純用Genistein不影響軟骨細胞生長.結論 PAP可能通過酪氨痠受體蛋白激酶介導,作用下遊的信號,引髮立早基因c-fos錶達,促進cyclinA的錶達,引起更多的細胞進入有絲分裂期,從而促進軟骨細胞增殖.
목적 탐토록용다태(PAP)촉진연골세포증식적궤제.방법 이12.5、25.0、50.0、100.0 μg/mL불동농도적PAP자격연골세포,도치상차현미경관찰연골세포생장정황,새서란법(MTT)검측연골세포적생장증식능력;이6、12、24、48 μg/mL불동농도락안산수체격매조단제Genistein작용우수PAP자격적연골세포,용MTT화류식세포의관찰Genistein대PAP작용적영향;면역조화SABC법검측핵증식항원cyclinA재PAP화PAP+Genistein작용하적표체변화,RT-PCR법검측c-fos mRNA표체.결과 PAP작용하c-fos mRNA여cyclinA표체증가,S기적세포비례증고,종6.4%증가도35.2%;Genistein작용후PAP적촉증식작용수도명현적억제,S기적세포강도4%,c-fos mRNA여cyclinA표체역감소;단순용Genistein불영향연골세포생장.결론 PAP가능통과락안산수체단백격매개도,작용하유적신호,인발립조기인c-fos표체,촉진cyclinA적표체,인기경다적세포진입유사분렬기,종이촉진연골세포증식.
