CAJ | 학술논문

[目的] 本研究试图在细胞和分子水平上探讨爱普列特对正常SD大鼠的生殖毒性,为指导临床用药提供理论基础.[方法] 以颈椎脱臼法处死大鼠,取精子置入预温37℃的M199培养液,调整精子浓度为(6.0±2.0)×105精子/ml.应用0.60、6和60 μmol/L的爱普列特处理精子,在给药1和2 h后用精子质量检测系统(CASA)分析精子运动能力.另在无菌条件下,取大鼠输精管,剪碎,以0.25%的胰蛋白酶溶液消化,待细胞分散后,经100 g离心5 min,用14-g金属网滤取单个分散的输精管细胞,将其置于37℃、5%CO2、95%空气和适宜湿度的二氧化碳培养箱培养.而后加入0.1,0.3或1 μmol/L的爱普列特处理一定时间,运用HE染色、流式细胞计数和PCR,研究爱普列特对SD大鼠精子及体外原代培养的输精管细胞的生殖毒性作用.[结果] 计算机辅助分析系统分析结果表明:大鼠精子给予0.6、6或60 μmol/L爱普列特处理2 h后,精子曲线运动速率(VCL)、精子直线运动速率(VSL)及精子活率(MOT)均较对照组下降,但无显著性差异.对照组、0.1、0.3和1.0 μmol/L爱普列特作用于输精管上皮细胞的凋亡率分别为5.2%、5.5%、47.67%和62.21%.HE染色显示,爱普列特0.3和1 μmol/L处理后细胞染色质向膜周边凝聚,核深染、固缩,呈明显的细胞凋亡现象.PCR结果显示:对照组与经爱普列特处理后的SD大鼠输精管细胞内均有bc1-2表达,DNA测序结果提示:给予爱普列特后,SD大鼠输精管细胞内bc1-2探针序列与溶剂对照组相比无明显变化.[结论] 在临床剂量范围内,爱普列特对SD大鼠精子活性无明显影响,与溶剂对照组相比,0.1 μmol/L爱普列特对正常SD大鼠输精管无明显不良作用;0.3和1 μmol/L可明显诱导正常SD大鼠输精管细胞发生凋亡,爱普列特对SD大鼠输精管细胞内bc1-2基因序列无影响.
[목적] 본연구시도재세포화분자수평상탐토애보렬특대정상SD대서적생식독성,위지도림상용약제공이론기출.[방법] 이경추탈구법처사대서,취정자치입예온37℃적M199배양액,조정정자농도위(6.0±2.0)×105정자/ml.응용0.60、6화60 μmol/L적애보렬특처리정자,재급약1화2 h후용정자질량검측계통(CASA)분석정자운동능력.령재무균조건하,취대서수정관,전쇄,이0.25%적이단백매용액소화,대세포분산후,경100 g리심5 min,용14-g금속망려취단개분산적수정관세포,장기치우37℃、5%CO2、95%공기화괄의습도적이양화탄배양상배양.이후가입0.1,0.3혹1 μmol/L적애보렬특처리일정시간,운용HE염색、류식세포계수화PCR,연구애보렬특대SD대서정자급체외원대배양적수정관세포적생식독성작용.[결과] 계산궤보조분석계통분석결과표명:대서정자급여0.6、6혹60 μmol/L애보렬특처리2 h후,정자곡선운동속솔(VCL)、정자직선운동속솔(VSL)급정자활솔(MOT)균교대조조하강,단무현저성차이.대조조、0.1、0.3화1.0 μmol/L애보렬특작용우수정관상피세포적조망솔분별위5.2%、5.5%、47.67%화62.21%.HE염색현시,애보렬특0.3화1 μmol/L처리후세포염색질향막주변응취,핵심염、고축,정명현적세포조망현상.PCR결과현시:대조조여경애보렬특처리후적SD대서수정관세포내균유bc1-2표체,DNA측서결과제시:급여애보렬특후,SD대서수정관세포내bc1-2탐침서렬여용제대조조상비무명현변화.[결론] 재림상제량범위내,애보렬특대SD대서정자활성무명현영향,여용제대조조상비,0.1 μmol/L애보렬특대정상SD대서수정관무명현불량작용;0.3화1 μmol/L가명현유도정상SD대서수정관세포발생조망,애보렬특대SD대서수정관세포내bc1-2기인서렬무영향.