生物物理学报
生物物理學報
생물물이학보
ACTA BIOPHYSICA SINICA
2002年
4期
462-466
,共5页
施广璞%杜洪震%刘子文%刘旭%吴元德
施廣璞%杜洪震%劉子文%劉旭%吳元德
시엄박%두홍진%류자문%류욱%오원덕
过氧化氢%胞内活性氧%信号转导
過氧化氫%胞內活性氧%信號轉導
과양화경%포내활성양%신호전도
以双氢罗丹明123(DHR123)作为荧光探针,采用激光共聚焦扫描显微镜研究小剂量(800nmol/L)H2O2诱导大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞内活性氧产生的动态变化过程及其机理.结果发现:(1)小剂量H2O2的一次作用可以引起胞内活性氧的产生;(2)胞内活性氧清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理2 h时后,再加入小剂量H2O2,发现胞内活性氧的产生明显减少;(3)用广谱的蛋白激酶抑制剂2-氨基嘌呤(2-AP)、Ca2+依赖性蛋白激酶(PKC)抑制剂Bisindolylmaleimide Ⅰ、酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂Tyrphostin 25分别预处理15 min后,H2O2诱导的胞内活性氧的产生现象均消失;(4)细胞在无外钙环境下,小剂量H2O2诱导的胞内活性氧的产生明显减少;(5)细胞在无外钙环境下用NAC预处理后,H2O2诱导的胞内活性氧的产生现象消失.结果表明,H2O2可以通过胞内信号转导系统诱使WB细胞胞内活性氧产生,这可能与小剂量H2O2调控细胞生物学功能(如增殖、转化)目关.
以雙氫囉丹明123(DHR123)作為熒光探針,採用激光共聚焦掃描顯微鏡研究小劑量(800nmol/L)H2O2誘導大鼠肝卵圓細胞株WB-F344細胞內活性氧產生的動態變化過程及其機理.結果髮現:(1)小劑量H2O2的一次作用可以引起胞內活性氧的產生;(2)胞內活性氧清除劑N-乙酰-L-半胱氨痠(NAC)處理2 h時後,再加入小劑量H2O2,髮現胞內活性氧的產生明顯減少;(3)用廣譜的蛋白激酶抑製劑2-氨基嘌呤(2-AP)、Ca2+依賴性蛋白激酶(PKC)抑製劑Bisindolylmaleimide Ⅰ、酪氨痠蛋白激酶(TPK)抑製劑Tyrphostin 25分彆預處理15 min後,H2O2誘導的胞內活性氧的產生現象均消失;(4)細胞在無外鈣環境下,小劑量H2O2誘導的胞內活性氧的產生明顯減少;(5)細胞在無外鈣環境下用NAC預處理後,H2O2誘導的胞內活性氧的產生現象消失.結果錶明,H2O2可以通過胞內信號轉導繫統誘使WB細胞胞內活性氧產生,這可能與小劑量H2O2調控細胞生物學功能(如增殖、轉化)目關.
이쌍경라단명123(DHR123)작위형광탐침,채용격광공취초소묘현미경연구소제량(800nmol/L)H2O2유도대서간란원세포주WB-F344세포내활성양산생적동태변화과정급기궤리.결과발현:(1)소제량H2O2적일차작용가이인기포내활성양적산생;(2)포내활성양청제제N-을선-L-반광안산(NAC)처리2 h시후,재가입소제량H2O2,발현포내활성양적산생명현감소;(3)용엄보적단백격매억제제2-안기표령(2-AP)、Ca2+의뢰성단백격매(PKC)억제제Bisindolylmaleimide Ⅰ、락안산단백격매(TPK)억제제Tyrphostin 25분별예처리15 min후,H2O2유도적포내활성양적산생현상균소실;(4)세포재무외개배경하,소제량H2O2유도적포내활성양적산생명현감소;(5)세포재무외개배경하용NAC예처리후,H2O2유도적포내활성양적산생현상소실.결과표명,H2O2가이통과포내신호전도계통유사WB세포포내활성양산생,저가능여소제량H2O2조공세포생물학공능(여증식、전화)목관.