CAJ | 학술논문

目的:研究PKCα结构与转位的关系.方法:用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体.观察它们在C2C12细胞中的表达及转位情况.结果:pPKCα-EGFP-N1转染C2C12肌细胞24h后,细胞内表达的PKCα-GFP融合蛋白主要定位于细胞浆,细胞核中未见分布.pPKCα-βI-EGFP-N1、pPKCβI-α-EGFP转染C2C12细胞24h的表达产物集中在胞浆.pPKCα(-)-EGFP-N1、pPKCα(m)-EGFP-N1转染C2C12细胞24h的定位与野生型明显不同.结论:PKCα的调节区(C1V1C2)尤其是RACK结合区(C2)、PKCα的催化区(C3V4C4)尤其是ATP结合位点与PKCα的转位密切相关.
목적:연구PKCα결구여전위적관계.방법:용PCR적방법구건료4개PKCα돌변체,재DNA련접매적작용하여pEGFP-N1결합후전이지질립중,구건PKCα돌변체-EGFP진핵표체재체.관찰타문재C2C12세포중적표체급전위정황.결과:pPKCα-EGFP-N1전염C2C12기세포24h후,세포내표체적PKCα-GFP융합단백주요정위우세포장,세포핵중미견분포.pPKCα-βI-EGFP-N1、pPKCβI-α-EGFP전염C2C12세포24h적표체산물집중재포장.pPKCα(-)-EGFP-N1、pPKCα(m)-EGFP-N1전염C2C12세포24h적정위여야생형명현불동.결론:PKCα적조절구(C1V1C2)우기시RACK결합구(C2)、PKCα적최화구(C3V4C4)우기시ATP결합위점여PKCα적전위밀절상관.