生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
3期
461-465
,共5页
张燕%李轻舟%杜连祥%戚薇%陈锦英
張燕%李輕舟%杜連祥%慼薇%陳錦英
장연%리경주%두련상%척미%진금영
肺炎克雷伯氏菌%荚膜多糖%提取%纯化%细胞免疫活性
肺炎剋雷伯氏菌%莢膜多糖%提取%純化%細胞免疫活性
폐염극뢰백씨균%협막다당%제취%순화%세포면역활성
采用液体深层培养得肺炎克雷伯氏菌Kp-9株发酵液,研究确立了菌体快速裂解条件:NP401%和胰蛋白酶250IU/g菌体,50℃作用1h,然后加入溶菌酶80μg/mL,56℃作用1h;裂解液经超滤浓缩和有机溶剂沉淀获得多糖粗品;多糖粗品先后经CTAB吸附分离,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换和Sephacryl S-300HR凝胶过滤纯化,得分子量分布相对均一的多糖纯品,产品得率为0.251g/L.采用淋巴细胞转化实验分别探讨了多糖粗品和纯品的免疫活性,研究显示荚膜多糖具有高效的体外细胞免疫活性,并具有典型的双向免疫调节作用.研究结论为肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的开发奠定了前期基础.
採用液體深層培養得肺炎剋雷伯氏菌Kp-9株髮酵液,研究確立瞭菌體快速裂解條件:NP401%和胰蛋白酶250IU/g菌體,50℃作用1h,然後加入溶菌酶80μg/mL,56℃作用1h;裂解液經超濾濃縮和有機溶劑沉澱穫得多糖粗品;多糖粗品先後經CTAB吸附分離,DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換和Sephacryl S-300HR凝膠過濾純化,得分子量分佈相對均一的多糖純品,產品得率為0.251g/L.採用淋巴細胞轉化實驗分彆探討瞭多糖粗品和純品的免疫活性,研究顯示莢膜多糖具有高效的體外細胞免疫活性,併具有典型的雙嚮免疫調節作用.研究結論為肺炎剋雷伯氏菌莢膜多糖的開髮奠定瞭前期基礎.
채용액체심층배양득폐염극뢰백씨균Kp-9주발효액,연구학립료균체쾌속렬해조건:NP401%화이단백매250IU/g균체,50℃작용1h,연후가입용균매80μg/mL,56℃작용1h;렬해액경초려농축화유궤용제침정획득다당조품;다당조품선후경CTAB흡부분리,DEAE-Sepharose Fast Flow리자교환화Sephacryl S-300HR응효과려순화,득분자량분포상대균일적다당순품,산품득솔위0.251g/L.채용림파세포전화실험분별탐토료다당조품화순품적면역활성,연구현시협막다당구유고효적체외세포면역활성,병구유전형적쌍향면역조절작용.연구결론위폐염극뢰백씨균협막다당적개발전정료전기기출.
