CAJ | 학술논문

目的:了解脐血细胞在搅拌悬浮生物反应器中的生长特性,为开发搅拌悬浮生物反应器大规模生产造血细胞提供实验依据.方法:实验于2003-06/11在华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室动物细胞与组织工程研究室完成.脐血细胞在基本细胞因子组合干细胞因子+白细胞介素3+白细胞介素6的刺激作用下,考察其在静态和动态培养系统中的生长规律,搅拌转速(30,60 r/min)对脐血细胞细胞周期分布和凋亡的影响以及不同形状搅拌桨(平翼桨、搅拌棒)对脐血细胞生长的影响.结果:①总细胞的扩增:随着细胞逐步适应体外生存环境,总细胞开始表现出增殖的趋势,且转瓶扩增效果略好于孔板,但差异不显著.②CD34+细胞的扩增:在相同细胞因子组合的培养条件下,动态培养在短期培养(1周左右)过程中表现出了明显的增殖优势,而静态培养更有利于维持造血干/祖细胞状态.③总集落形成细胞的扩增:在短期培养中动态培养系统具有明显的生长优势,随着培养时间的延长,静态培养对总集落形成细胞的维持作用优于动态培养.④不同搅拌转速对脐血细胞细胞周期分布和凋亡的影响:相对于静态培养,CD34+细胞除了G2期含量显著增加外,对其他细胞周期和凋亡无显著影响,随着搅拌转速从30 r/min提高到60r/min时,CD34+细胞周期分布和凋亡差异不明显,而细胞周期分布和凋亡比率在静态培养和60 r/min的转瓶培养情况下更为相似,表明流体作用力的增强对CD34+细胞的生长行为没有影响.⑤不同搅拌桨形状对造血细胞培养的影响:相同搅拌转速(30 r/min)下培养来源相同的脐血细胞,1周后平翼桨转瓶中的单个核细胞数锐减,而搅拌棒转瓶却能保持基本不变,且差异显著(P＜0.05).说明不同搅拌桨形式导致混合方式的差异以及由此产生的不同流体作用力等对造血细胞增殖造成某种程度的影响.结论:动态培养能支持脐血细胞的生长,且造血干/祖细胞的增殖优于静态培养.搅拌转速的增加对脐血细胞细胞周期分布和凋亡无显著影响,而不同的搅拌形式与脐血细胞的增殖有关. 目的:瞭解臍血細胞在攪拌懸浮生物反應器中的生長特性,為開髮攪拌懸浮生物反應器大規模生產造血細胞提供實驗依據.方法:實驗于2003-06/11在華東理工大學生物反應器工程國傢重點實驗室動物細胞與組織工程研究室完成.臍血細胞在基本細胞因子組閤榦細胞因子+白細胞介素3+白細胞介素6的刺激作用下,攷察其在靜態和動態培養繫統中的生長規律,攪拌轉速(30,60 r/min)對臍血細胞細胞週期分佈和凋亡的影響以及不同形狀攪拌槳(平翼槳、攪拌棒)對臍血細胞生長的影響.結果:①總細胞的擴增:隨著細胞逐步適應體外生存環境,總細胞開始錶現齣增殖的趨勢,且轉瓶擴增效果略好于孔闆,但差異不顯著.②CD34+細胞的擴增:在相同細胞因子組閤的培養條件下,動態培養在短期培養(1週左右)過程中錶現齣瞭明顯的增殖優勢,而靜態培養更有利于維持造血榦/祖細胞狀態.③總集落形成細胞的擴增:在短期培養中動態培養繫統具有明顯的生長優勢,隨著培養時間的延長,靜態培養對總集落形成細胞的維持作用優于動態培養.④不同攪拌轉速對臍血細胞細胞週期分佈和凋亡的影響:相對于靜態培養,CD34+細胞除瞭G2期含量顯著增加外,對其他細胞週期和凋亡無顯著影響,隨著攪拌轉速從30 r/min提高到60r/min時,CD34+細胞週期分佈和凋亡差異不明顯,而細胞週期分佈和凋亡比率在靜態培養和60 r/min的轉瓶培養情況下更為相似,錶明流體作用力的增彊對CD34+細胞的生長行為沒有影響.⑤不同攪拌槳形狀對造血細胞培養的影響:相同攪拌轉速(30 r/min)下培養來源相同的臍血細胞,1週後平翼槳轉瓶中的單箇覈細胞數銳減,而攪拌棒轉瓶卻能保持基本不變,且差異顯著(P＜0.05).說明不同攪拌槳形式導緻混閤方式的差異以及由此產生的不同流體作用力等對造血細胞增殖造成某種程度的影響.結論:動態培養能支持臍血細胞的生長,且造血榦/祖細胞的增殖優于靜態培養.攪拌轉速的增加對臍血細胞細胞週期分佈和凋亡無顯著影響,而不同的攪拌形式與臍血細胞的增殖有關.
목적:료해제혈세포재교반현부생물반응기중적생장특성,위개발교반현부생물반응기대규모생산조혈세포제공실험의거.방법:실험우2003-06/11재화동리공대학생물반응기공정국가중점실험실동물세포여조직공정연구실완성.제혈세포재기본세포인자조합간세포인자+백세포개소3+백세포개소6적자격작용하,고찰기재정태화동태배양계통중적생장규률,교반전속(30,60 r/min)대제혈세포세포주기분포화조망적영향이급불동형상교반장(평익장、교반봉)대제혈세포생장적영향.결과:①총세포적확증:수착세포축보괄응체외생존배경,총세포개시표현출증식적추세,차전병확증효과략호우공판,단차이불현저.②CD34+세포적확증:재상동세포인자조합적배양조건하,동태배양재단기배양(1주좌우)과정중표현출료명현적증식우세,이정태배양경유리우유지조혈간/조세포상태.③총집락형성세포적확증:재단기배양중동태배양계통구유명현적생장우세,수착배양시간적연장,정태배양대총집락형성세포적유지작용우우동태배양.④불동교반전속대제혈세포세포주기분포화조망적영향:상대우정태배양,CD34+세포제료G2기함량현저증가외,대기타세포주기화조망무현저영향,수착교반전속종30 r/min제고도60r/min시,CD34+세포주기분포화조망차이불명현,이세포주기분포화조망비솔재정태배양화60 r/min적전병배양정황하경위상사,표명류체작용력적증강대CD34+세포적생장행위몰유영향.⑤불동교반장형상대조혈세포배양적영향:상동교반전속(30 r/min)하배양래원상동적제혈세포,1주후평익장전병중적단개핵세포수예감,이교반봉전병각능보지기본불변,차차이현저(P＜0.05).설명불동교반장형식도치혼합방식적차이이급유차산생적불동류체작용력등대조혈세포증식조성모충정도적영향.결론:동태배양능지지제혈세포적생장,차조혈간/조세포적증식우우정태배양.교반전속적증가대제혈세포세포주기분포화조망무현저영향,이불동적교반형식여제혈세포적증식유관.