科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2007年
8期
1573-1576
,共4页
杨泉生%朱庆生%李立文%张大伟%曹晓瑞%李文献
楊泉生%硃慶生%李立文%張大偉%曹曉瑞%李文獻
양천생%주경생%리립문%장대위%조효서%리문헌
透明质酸合成酶%透明质酸%EGFP
透明質痠閤成酶%透明質痠%EGFP
투명질산합성매%투명질산%EGFP
构建了透明质酸合成酶2真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达.利用RT-PCR法从MG63细胞总RNA中扩增,获得人透明质酸合成酶2 cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-N3,将经双酶切鉴定和DNA测序证实的阳性重组子命名为pEGFP-N3-HAS2.脂质体法转染HEK293细胞,用倒置荧光显微镜检测、分析其在HEK293细胞表达及定位.双酶切鉴定和DNA测序证实成功构建pEGFP-N3-HAS2真核表达载体.转染HEK293细胞后可见HAS2-EGFP融合蛋白高表达并定位于浆膜.该载体的成功构建为进一步探讨透明质酸合成酶2在治疗骨性关节炎、修复关节软骨缺损中的应用价值奠定了基础.
構建瞭透明質痠閤成酶2真覈錶達載體,併觀察其在真覈細胞中的錶達.利用RT-PCR法從MG63細胞總RNA中擴增,穫得人透明質痠閤成酶2 cDNA,併剋隆至真覈錶達載體pEGFP-N3,將經雙酶切鑒定和DNA測序證實的暘性重組子命名為pEGFP-N3-HAS2.脂質體法轉染HEK293細胞,用倒置熒光顯微鏡檢測、分析其在HEK293細胞錶達及定位.雙酶切鑒定和DNA測序證實成功構建pEGFP-N3-HAS2真覈錶達載體.轉染HEK293細胞後可見HAS2-EGFP融閤蛋白高錶達併定位于漿膜.該載體的成功構建為進一步探討透明質痠閤成酶2在治療骨性關節炎、脩複關節軟骨缺損中的應用價值奠定瞭基礎.
구건료투명질산합성매2진핵표체재체,병관찰기재진핵세포중적표체.이용RT-PCR법종MG63세포총RNA중확증,획득인투명질산합성매2 cDNA,병극륭지진핵표체재체pEGFP-N3,장경쌍매절감정화DNA측서증실적양성중조자명명위pEGFP-N3-HAS2.지질체법전염HEK293세포,용도치형광현미경검측、분석기재HEK293세포표체급정위.쌍매절감정화DNA측서증실성공구건pEGFP-N3-HAS2진핵표체재체.전염HEK293세포후가견HAS2-EGFP융합단백고표체병정위우장막.해재체적성공구건위진일보탐토투명질산합성매2재치료골성관절염、수복관절연골결손중적응용개치전정료기출.
