Lipocalin文库的构建及与克百威有结合活性的小分子筛选
Lipocalin문고적구건급여극백위유결합활성적소분자사선
Construction of Phage-displayed Library Based on the Lipocalin Scaffold and Screening Anticalins with Specificity for Carbofuran
  • 万方数据
    高等学校化学学报 고등학교화학학보
    CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
    2008年 3期 528-532 ,共5页

    武婕%杨金易%张宏斌%潘科%王弘%雷红涛%郑霖%肖治理%孙远明

    무첩%양금역%장굉빈%반과%왕홍%뢰홍도%정림%초치리%손원명

    Lipocalin文库%克百威%Anticalin分子 Lipocalin文庫%剋百威%Anticalin分子
    Lipocalin문고%극백위%Anticalin분자
    构建大菜粉蝶Lipocalin蛋白家族中的BBP蛋白突变文库,依据基因序列,分别设计10条和12条引物,通过PCR重叠延伸法得到包含随机突变蛋白BBP的基因序列,并重组到噬菌粒载体pCANTAB5E中构建Lipocalin突变文库,库容达到4.0×109.以偶联分子BSA-克百威和OVA-克百威为靶分子,采用柱式和平皿式交叉法对Lipocalin文库进行了筛选,用竞争洗脱法洗脱特异结合活性的噬菌体.经过3轮筛选,从第3轮的洗脱液中随机挑选了10个重组克隆,用Dot-blotting法检测出K7 anticalin分子能与克百威特异结合.为研发克百威的Anticalin类检测试剂盒提供了候选分子,也为拓宽Lipocalin文库在有害小分子检测方面的应用奠定了基础.
    구건대채분접Lipocalin단백가족중적BBP단백돌변문고,의거기인서렬,분별설계10조화12조인물,통과PCR중첩연신법득도포함수궤돌변단백BBP적기인서렬,병중조도서균립재체pCANTAB5E중구건Lipocalin돌변문고,고용체도4.0×109.이우련분자BSA-극백위화OVA-극백위위파분자,채용주식화평명식교차법대Lipocalin문고진행료사선,용경쟁세탈법세탈특이결합활성적서균체.경과3륜사선,종제3륜적세탈액중수궤도선료10개중조극륭,용Dot-blotting법검측출K7 anticalin분자능여극백위특이결합.위연발극백위적Anticalin류검측시제합제공료후선분자,야위탁관Lipocalin문고재유해소분자검측방면적응용전정료기출.
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