哈尔滨工业大学学报
哈爾濱工業大學學報
합이빈공업대학학보
JOURNAL OF HARBIN INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2008年
6期
865-869
,共5页
林海龙%任南琪%郑国香%张坤%段志洁
林海龍%任南琪%鄭國香%張坤%段誌潔
림해룡%임남기%정국향%장곤%단지길
乙醛乙醇脱氢酶基因%clustalw%生物制氢细菌%简并引物
乙醛乙醇脫氫酶基因%clustalw%生物製氫細菌%簡併引物
을철을순탈경매기인%clustalw%생물제경세균%간병인물
为研究乙醛乙醇脱氢酶基因及其在乙醇发酵生物制氢中的重要作用,采用chstalw对12个菌种的乙醛乙醇脱氢酶蛋白质序列进行多重比对分析,共得到6个保守区,以这6个保守区设计引物,共选用9对简并引物,命名为ADHJ1、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9.用这9对引物对B49总DNA进行简并PCR,共有两对引物的扩增得到预期的结果.其PCR产物经pMD18 - T克隆转化至大肠杆菌DH5α中,经筛选后测序.结果表明,这两段DNA推导的氨基酸序列与Bacillus cereus的乙醛乙醇脱氢酶基因的相似性最高为69%,证实所克隆的序列为乙醛乙醇脱氢酶基因DNA片段.尽管采用chstalw软件设计ADHJ5简并引物的简并度分别达1048576倍和98304倍,引物长度分别为30 bp和26 bp,但扩增结果特异性强.说明采用clustalw软件设计的简并引物可信度高,同时,也说明简并度不是合理评判简并引物质量的标准.
為研究乙醛乙醇脫氫酶基因及其在乙醇髮酵生物製氫中的重要作用,採用chstalw對12箇菌種的乙醛乙醇脫氫酶蛋白質序列進行多重比對分析,共得到6箇保守區,以這6箇保守區設計引物,共選用9對簡併引物,命名為ADHJ1、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9.用這9對引物對B49總DNA進行簡併PCR,共有兩對引物的擴增得到預期的結果.其PCR產物經pMD18 - T剋隆轉化至大腸桿菌DH5α中,經篩選後測序.結果錶明,這兩段DNA推導的氨基痠序列與Bacillus cereus的乙醛乙醇脫氫酶基因的相似性最高為69%,證實所剋隆的序列為乙醛乙醇脫氫酶基因DNA片段.儘管採用chstalw軟件設計ADHJ5簡併引物的簡併度分彆達1048576倍和98304倍,引物長度分彆為30 bp和26 bp,但擴增結果特異性彊.說明採用clustalw軟件設計的簡併引物可信度高,同時,也說明簡併度不是閤理評判簡併引物質量的標準.
위연구을철을순탈경매기인급기재을순발효생물제경중적중요작용,채용chstalw대12개균충적을철을순탈경매단백질서렬진행다중비대분석,공득도6개보수구,이저6개보수구설계인물,공선용9대간병인물,명명위ADHJ1、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9.용저9대인물대B49총DNA진행간병PCR,공유량대인물적확증득도예기적결과.기PCR산물경pMD18 - T극륭전화지대장간균DH5α중,경사선후측서.결과표명,저량단DNA추도적안기산서렬여Bacillus cereus적을철을순탈경매기인적상사성최고위69%,증실소극륭적서렬위을철을순탈경매기인DNA편단.진관채용chstalw연건설계ADHJ5간병인물적간병도분별체1048576배화98304배,인물장도분별위30 bp화26 bp,단확증결과특이성강.설명채용clustalw연건설계적간병인물가신도고,동시,야설명간병도불시합리평판간병인물질량적표준.