中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
1期
40-43
,共4页
刘北一%蒋小滔%罗海波%富宁
劉北一%蔣小滔%囉海波%富寧
류북일%장소도%라해파%부저
细菌脂多糖(LPS)%单克隆抗体%共同表位
細菌脂多糖(LPS)%單剋隆抗體%共同錶位
세균지다당(LPS)%단극륭항체%공동표위
目的:利用噬菌体肽库技术筛选抗广谱革兰氏阴性菌与LPS单克隆抗体3A8的识别表位,以获得来源于不同LPS的保守表位.方法:用广谱抗G-菌、LPS的单克隆抗体3A8为靶,筛选噬菌体环七肽库,蚴鉴定阳性噬菌体克隆并测序.根据阳性保守序列合成短肽A2及A5,并与KLH载体交联,ELISA鉴定A2-KLH、A5-KLH与3A8单抗的结合.结果:随机挑选的33个噬菌体克隆中有15个可特异性与3A8结合,该结合可被LPS2630所抑制.根据阳性克隆DNA序列推导氨基酸序列,共有7种序列,均以疏水氨基酸为主,且包含保守序列Ser Pro Pro/Pro X Pro;选择所获阳性序列经设计与改造合成延长的两个环肽;经ELISA鉴定表明这些环肽可特异地与3A8结合.结论:得到可被3A8单抗特异性识别并含保守残基Ser Pro Pro/ProX Pro的阳性序列,据此合成的短肽可特异性结合3A8,提示该短肽可能模拟LPs共同表位的抗原性,有望成为疫苗候选表位.
目的:利用噬菌體肽庫技術篩選抗廣譜革蘭氏陰性菌與LPS單剋隆抗體3A8的識彆錶位,以穫得來源于不同LPS的保守錶位.方法:用廣譜抗G-菌、LPS的單剋隆抗體3A8為靶,篩選噬菌體環七肽庫,蚴鑒定暘性噬菌體剋隆併測序.根據暘性保守序列閤成短肽A2及A5,併與KLH載體交聯,ELISA鑒定A2-KLH、A5-KLH與3A8單抗的結閤.結果:隨機挑選的33箇噬菌體剋隆中有15箇可特異性與3A8結閤,該結閤可被LPS2630所抑製.根據暘性剋隆DNA序列推導氨基痠序列,共有7種序列,均以疏水氨基痠為主,且包含保守序列Ser Pro Pro/Pro X Pro;選擇所穫暘性序列經設計與改造閤成延長的兩箇環肽;經ELISA鑒定錶明這些環肽可特異地與3A8結閤.結論:得到可被3A8單抗特異性識彆併含保守殘基Ser Pro Pro/ProX Pro的暘性序列,據此閤成的短肽可特異性結閤3A8,提示該短肽可能模擬LPs共同錶位的抗原性,有望成為疫苗候選錶位.
목적:이용서균체태고기술사선항엄보혁란씨음성균여LPS단극륭항체3A8적식별표위,이획득래원우불동LPS적보수표위.방법:용엄보항G-균、LPS적단극륭항체3A8위파,사선서균체배칠태고,유감정양성서균체극륭병측서.근거양성보수서렬합성단태A2급A5,병여KLH재체교련,ELISA감정A2-KLH、A5-KLH여3A8단항적결합.결과:수궤도선적33개서균체극륭중유15개가특이성여3A8결합,해결합가피LPS2630소억제.근거양성극륭DNA서렬추도안기산서렬,공유7충서렬,균이소수안기산위주,차포함보수서렬Ser Pro Pro/Pro X Pro;선택소획양성서렬경설계여개조합성연장적량개배태;경ELISA감정표명저사배태가특이지여3A8결합.결론:득도가피3A8단항특이성식별병함보수잔기Ser Pro Pro/ProX Pro적양성서렬,거차합성적단태가특이성결합3A8,제시해단태가능모의LPs공동표위적항원성,유망성위역묘후선표위.
