西南林学院学报
西南林學院學報
서남림학원학보
JOURNAL OF SOUTHWEST FORESTRY COLLEGE
2009年
2期
27-30
,共4页
云南松%胚乳DNA提取%ISSR分子标记
雲南鬆%胚乳DNA提取%ISSR分子標記
운남송%배유DNA제취%ISSR분자표기
以云南松胚乳为试验材料,用改进的SDS法进行DNA的提取,并对其纯度、浓度及产率进行检测,结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要;采用单因子试验分析法分别研究模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、退火温度对反应体系的影响,建立并优化云南松ISSR-PCR 20μL反应体系:buffer(10mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.5U TaqDNA聚合酶,0.2mmol/L dNTPs,30ng模板DNA,引物(GA)8的最适退火温度为52.5℃.
以雲南鬆胚乳為試驗材料,用改進的SDS法進行DNA的提取,併對其純度、濃度及產率進行檢測,結果錶明:DNA擴增效果良好,完全能滿足進一步試驗的需要;採用單因子試驗分析法分彆研究模闆DNA濃度、引物濃度、Mg2+濃度、TaqDNA聚閤酶用量、dNTP濃度、退火溫度對反應體繫的影響,建立併優化雲南鬆ISSR-PCR 20μL反應體繫:buffer(10mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.5U TaqDNA聚閤酶,0.2mmol/L dNTPs,30ng模闆DNA,引物(GA)8的最適退火溫度為52.5℃.
이운남송배유위시험재료,용개진적SDS법진행DNA적제취,병대기순도、농도급산솔진행검측,결과표명:DNA확증효과량호,완전능만족진일보시험적수요;채용단인자시험분석법분별연구모판DNA농도、인물농도、Mg2+농도、TaqDNA취합매용량、dNTP농도、퇴화온도대반응체계적영향,건립병우화운남송ISSR-PCR 20μL반응체계:buffer(10mmol/L Tris-HCl,50mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L인물,1.5mmol/L MgCl2,0.5U TaqDNA취합매,0.2mmol/L dNTPs,30ng모판DNA,인물(GA)8적최괄퇴화온도위52.5℃.
