福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
1期
28-31
,共4页
倪秀雄%刘丽燕%刘永建%曾真%袁明洲%陈玄
倪秀雄%劉麗燕%劉永建%曾真%袁明洲%陳玄
예수웅%류려연%류영건%증진%원명주%진현
树突状细胞%RNA,小分子干扰%毕西巴尼%免疫耐受
樹突狀細胞%RNA,小分子榦擾%畢西巴尼%免疫耐受
수돌상세포%RNA,소분자간우%필서파니%면역내수
目的 探讨小鼠骨髓树突状细胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432诱导DCs 成熟中的作用机制.方法 分离小鼠骨髓单核细胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)的培养体系中诱导培养,所得的细胞即为DCs.于培养的第5天,将细胞分为3组:对照组不加OK-432和MyD88 siRNA;OK-432组加入终浓度为5 μg/mL的OK-432;RNA干扰组加入MyD88 siRNA 12 h后,再加入5 μg/mL OK-432刺激.半定量RT-PCR法检测DCs中MyD88的表达;ELISA法检测各组DCs分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法检测DCs体外刺激同种混合淋巴细胞增殖的免疫活性.结果 OK-432组DCs的MyD88高表达、TNF-α和IL-12释放明显增加并能诱导较强混合淋巴细胞反应,而用MyD88 siRNA干扰后以上效应均降低(P＜0.05).结论 靶向MyD88 siRNA可明显抑制小鼠DCs中MyD88的表达和OK-432诱导的DCs成熟,表明MyD88介导OK-432诱导的DCs成熟.
目的 探討小鼠骨髓樹突狀細胞(DCs)髓性分化蛋白88(MyD88)在OK-432誘導DCs 成熟中的作用機製.方法 分離小鼠骨髓單覈細胞(BMMCs),在含10%胎牛血清、重組小鼠粒-巨噬細胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重組小鼠白細胞介素-4(rmIL-4)的培養體繫中誘導培養,所得的細胞即為DCs.于培養的第5天,將細胞分為3組:對照組不加OK-432和MyD88 siRNA;OK-432組加入終濃度為5 μg/mL的OK-432;RNA榦擾組加入MyD88 siRNA 12 h後,再加入5 μg/mL OK-432刺激.半定量RT-PCR法檢測DCs中MyD88的錶達;ELISA法檢測各組DCs分泌腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和IL-12的能力;MTT法檢測DCs體外刺激同種混閤淋巴細胞增殖的免疫活性.結果 OK-432組DCs的MyD88高錶達、TNF-α和IL-12釋放明顯增加併能誘導較彊混閤淋巴細胞反應,而用MyD88 siRNA榦擾後以上效應均降低(P＜0.05).結論 靶嚮MyD88 siRNA可明顯抑製小鼠DCs中MyD88的錶達和OK-432誘導的DCs成熟,錶明MyD88介導OK-432誘導的DCs成熟.
목적 탐토소서골수수돌상세포(DCs)수성분화단백88(MyD88)재OK-432유도DCs 성숙중적작용궤제.방법 분리소서골수단핵세포(BMMCs),재함10%태우혈청、중조소서립-거서세포집락자격인자(rmGM-CSF)、중조소서백세포개소-4(rmIL-4)적배양체계중유도배양,소득적세포즉위DCs.우배양적제5천,장세포분위3조:대조조불가OK-432화MyD88 siRNA;OK-432조가입종농도위5 μg/mL적OK-432;RNA간우조가입MyD88 siRNA 12 h후,재가입5 μg/mL OK-432자격.반정량RT-PCR법검측DCs중MyD88적표체;ELISA법검측각조DCs분비종류배사인자-α(TNF-α)화IL-12적능력;MTT법검측DCs체외자격동충혼합림파세포증식적면역활성.결과 OK-432조DCs적MyD88고표체、TNF-α화IL-12석방명현증가병능유도교강혼합림파세포반응,이용MyD88 siRNA간우후이상효응균강저(P＜0.05).결론 파향MyD88 siRNA가명현억제소서DCs중MyD88적표체화OK-432유도적DCs성숙,표명MyD88개도OK-432유도적DCs성숙.
