西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
6期
696-698
,共3页
戴佳琳%黄江%廖兴江%李波%王宇
戴佳琳%黃江%廖興江%李波%王宇
대가림%황강%료흥강%리파%왕우
亚洲带绦虫%膜联蛋白B2%基因克隆%免疫反应性
亞洲帶縚蟲%膜聯蛋白B2%基因剋隆%免疫反應性
아주대조충%막련단백B2%기인극륭%면역반응성
目的 对亚洲带绦虫膜联蛋白B2(Annexins B2)进行克隆表达及免疫学初步研究.方法 利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出Annexins B2基因,并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用Western blotting进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及重组质粒DNA测序均显示重组体构建成功,并得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫及牛带绦虫患者的血清识别.结论 亚洲带绦虫成虫Annexins B2基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达.
目的 對亞洲帶縚蟲膜聯蛋白B2(Annexins B2)進行剋隆錶達及免疫學初步研究.方法 利用在線生物信息學工具從亞洲帶縚蟲成蟲cDNA文庫中篩選齣Annexins B2基因,併將該基因剋隆到原覈錶達質粒pET-28a(+)中,在大腸埃希菌BL21/DE3中誘導錶達,錶達產物通過十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)鑒定,重組後的蛋白用His-鎳蛋白純化柱純化,純化的重組蛋白用Western blotting進行免疫學分析.結果 PCR、雙酶切及重組質粒DNA測序均顯示重組體構建成功,併得到高純度的蛋白,且該重組蛋白可被亞洲帶縚蟲、豬帶縚蟲及牛帶縚蟲患者的血清識彆.結論 亞洲帶縚蟲成蟲Annexins B2基因可在原覈錶達繫統中穫得具有免疫活性的高效錶達.
목적 대아주대조충막련단백B2(Annexins B2)진행극륭표체급면역학초보연구.방법 이용재선생물신식학공구종아주대조충성충cDNA문고중사선출Annexins B2기인,병장해기인극륭도원핵표체질립pET-28a(+)중,재대장애희균BL21/DE3중유도표체,표체산물통과십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)감정,중조후적단백용His-얼단백순화주순화,순화적중조단백용Western blotting진행면역학분석.결과 PCR、쌍매절급중조질립DNA측서균현시중조체구건성공,병득도고순도적단백,차해중조단백가피아주대조충、저대조충급우대조충환자적혈청식별.결론 아주대조충성충Annexins B2기인가재원핵표체계통중획득구유면역활성적고효표체.