大连海洋大学学报
大連海洋大學學報
대련해양대학학보
JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY
2010年
6期
488-494
,共7页
崔来宾%叶星%邓国成%江小燕%田园园%白俊杰%黎坚平
崔來賓%葉星%鄧國成%江小燕%田園園%白俊傑%黎堅平
최래빈%협성%산국성%강소연%전완완%백준걸%려견평
草鱼%铜绿假单胞菌%生化鉴定%16S rRNA%rpoB%gyrB基因%药物敏感性
草魚%銅綠假單胞菌%生化鑒定%16S rRNA%rpoB%gyrB基因%藥物敏感性
초어%동록가단포균%생화감정%16S rRNA%rpoB%gyrB기인%약물민감성
从患病草鱼Ctenopharyngodon idella体表病灶上分离到一株优势菌,经分离纯化培养制成细菌悬液,分别以腹腔注射和浸泡两种方式感染草鱼.结果表明:该菌株能感染草鱼,且具较强毒力,腹腔注射0.2 mL该菌液(3×109 cfu/mL),可导致受试草鱼100%死亡;创伤浸泡感染(3×108 cfu/mL),死亡率也达100%, 受感染鱼出现与自然感染相似的类似赤皮病症状.对该病菌进行形态特征观察和主要理化特性分析,初步鉴定为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa.进一步对该菌进行分子鉴定,共选用16S rRNA、RNA聚合酶β亚单位(rpoB)和促旋酶亚单位蛋白(gyrB)3个基因进行鉴定分析.序列克隆与BLAST分析结果显示,这3个基因均与GenBank上登录的铜绿假单胞菌的相应序列具有很高的同源性,16S rRNA、rpoB和gyrB基因与已知铜绿假单胞菌相应序列的同源性分别在99%、98%和93%以上.综合生理生化与分子鉴定结果,可判定所分离的菌株为铜绿假单胞菌.药敏试验结果显示:该菌对阿米卡星、菌必治、氟哌酸和妥布霉素等11种药物高度敏感,对链霉素和庆大霉素中度敏感,对罗红霉素、红霉素、四环素、苯唑青霉素、新霉素和头孢氨苄等16种药物具有耐药性.
從患病草魚Ctenopharyngodon idella體錶病竈上分離到一株優勢菌,經分離純化培養製成細菌懸液,分彆以腹腔註射和浸泡兩種方式感染草魚.結果錶明:該菌株能感染草魚,且具較彊毒力,腹腔註射0.2 mL該菌液(3×109 cfu/mL),可導緻受試草魚100%死亡;創傷浸泡感染(3×108 cfu/mL),死亡率也達100%, 受感染魚齣現與自然感染相似的類似赤皮病癥狀.對該病菌進行形態特徵觀察和主要理化特性分析,初步鑒定為銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa.進一步對該菌進行分子鑒定,共選用16S rRNA、RNA聚閤酶β亞單位(rpoB)和促鏇酶亞單位蛋白(gyrB)3箇基因進行鑒定分析.序列剋隆與BLAST分析結果顯示,這3箇基因均與GenBank上登錄的銅綠假單胞菌的相應序列具有很高的同源性,16S rRNA、rpoB和gyrB基因與已知銅綠假單胞菌相應序列的同源性分彆在99%、98%和93%以上.綜閤生理生化與分子鑒定結果,可判定所分離的菌株為銅綠假單胞菌.藥敏試驗結果顯示:該菌對阿米卡星、菌必治、氟哌痠和妥佈黴素等11種藥物高度敏感,對鏈黴素和慶大黴素中度敏感,對囉紅黴素、紅黴素、四環素、苯唑青黴素、新黴素和頭孢氨芐等16種藥物具有耐藥性.
종환병초어Ctenopharyngodon idella체표병조상분리도일주우세균,경분리순화배양제성세균현액,분별이복강주사화침포량충방식감염초어.결과표명:해균주능감염초어,차구교강독력,복강주사0.2 mL해균액(3×109 cfu/mL),가도치수시초어100%사망;창상침포감염(3×108 cfu/mL),사망솔야체100%, 수감염어출현여자연감염상사적유사적피병증상.대해병균진행형태특정관찰화주요이화특성분석,초보감정위동록가단포균Pseudomonas aeruginosa.진일보대해균진행분자감정,공선용16S rRNA、RNA취합매β아단위(rpoB)화촉선매아단위단백(gyrB)3개기인진행감정분석.서렬극륭여BLAST분석결과현시,저3개기인균여GenBank상등록적동록가단포균적상응서렬구유흔고적동원성,16S rRNA、rpoB화gyrB기인여이지동록가단포균상응서렬적동원성분별재99%、98%화93%이상.종합생리생화여분자감정결과,가판정소분리적균주위동록가단포균.약민시험결과현시:해균대아미잡성、균필치、불고산화타포매소등11충약물고도민감,대련매소화경대매소중도민감,대라홍매소、홍매소、사배소、분서청매소、신매소화두포안변등16충약물구유내약성.