肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2012年
2期
85-91
,共7页
孙克康%徐加英%赵琳%焦旸
孫剋康%徐加英%趙琳%焦旸
손극강%서가영%조림%초양
肺肿瘤%迁移%侵袭%基因,TOB1%细胞,A549%体外
肺腫瘤%遷移%侵襲%基因,TOB1%細胞,A549%體外
폐종류%천이%침습%기인,TOB1%세포,A549%체외
目的:探讨TOB1 (transducer of ErbB 2,1)高表达对人肺癌A549细胞体外迁移和侵袭的影响.方法:应用RT-PCR法检测人支气管上皮细胞HBE和10种肺癌细胞中TOB1、PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)、乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)、RHOC(ras homolog gene family,member C)和NME1 (non-metastatic cells 1)mRNA的表达水平;将重组表达载体质粒pcDNA3.0-TOB1和“空载体”质粒pcDNA3.0转染到A549细胞中,建立TOB1高表达的A549/TOB1细胞和对照组A549/PC3细胞,应用体外划痕和Transwell实验检测细胞的体外迁移和侵袭能力,RT-PCR法检测细胞中PTEN、BRMS1、RHOC和NME1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测细胞中α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9蛋白的表达.结果:10种肺癌细胞中TOB1 mRNA的表达水平明显低于HBE细胞(P<0.05),不同细胞株中TOB1 mRNA与PTEN、BRMS1和NME1 mRNA的表达水平间呈正相关(P<0.05).A549/TOB1细胞的体外迁移和侵袭能力明显低于A549细胞(P<0.05).A549/TOB1细胞中PTEN、BRMS1和NME1 mRNA的表达水平明显高于A549细胞(P<0.05),而RHOC mRNA的表达水平明显低于A549细胞(P<0.05); A549/TOB1细胞中α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2和MMP9蛋白的表达水平明显低于A549细胞(P<0.05).结论:外源性TOB1高表达可以明显抑制肺癌A549细胞的体外转移和侵袭,其机制可能与TOB1调控PTEN、BRMS1、RHOC和NME1的表达,进一步下调α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2和MMP9蛋白的表达水平有关.
目的:探討TOB1 (transducer of ErbB 2,1)高錶達對人肺癌A549細胞體外遷移和侵襲的影響.方法:應用RT-PCR法檢測人支氣管上皮細胞HBE和10種肺癌細胞中TOB1、PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)、乳腺癌轉移抑製基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)、RHOC(ras homolog gene family,member C)和NME1 (non-metastatic cells 1)mRNA的錶達水平;將重組錶達載體質粒pcDNA3.0-TOB1和“空載體”質粒pcDNA3.0轉染到A549細胞中,建立TOB1高錶達的A549/TOB1細胞和對照組A549/PC3細胞,應用體外劃痕和Transwell實驗檢測細胞的體外遷移和侵襲能力,RT-PCR法檢測細胞中PTEN、BRMS1、RHOC和NME1 mRNA的錶達,蛋白質印跡法檢測細胞中α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、基質金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9蛋白的錶達.結果:10種肺癌細胞中TOB1 mRNA的錶達水平明顯低于HBE細胞(P<0.05),不同細胞株中TOB1 mRNA與PTEN、BRMS1和NME1 mRNA的錶達水平間呈正相關(P<0.05).A549/TOB1細胞的體外遷移和侵襲能力明顯低于A549細胞(P<0.05).A549/TOB1細胞中PTEN、BRMS1和NME1 mRNA的錶達水平明顯高于A549細胞(P<0.05),而RHOC mRNA的錶達水平明顯低于A549細胞(P<0.05); A549/TOB1細胞中α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2和MMP9蛋白的錶達水平明顯低于A549細胞(P<0.05).結論:外源性TOB1高錶達可以明顯抑製肺癌A549細胞的體外轉移和侵襲,其機製可能與TOB1調控PTEN、BRMS1、RHOC和NME1的錶達,進一步下調α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2和MMP9蛋白的錶達水平有關.
목적:탐토TOB1 (transducer of ErbB 2,1)고표체대인폐암A549세포체외천이화침습적영향.방법:응용RT-PCR법검측인지기관상피세포HBE화10충폐암세포중TOB1、PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)、유선암전이억제기인1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)、RHOC(ras homolog gene family,member C)화NME1 (non-metastatic cells 1)mRNA적표체수평;장중조표체재체질립pcDNA3.0-TOB1화“공재체”질립pcDNA3.0전염도A549세포중,건립TOB1고표체적A549/TOB1세포화대조조A549/PC3세포,응용체외화흔화Transwell실험검측세포적체외천이화침습능력,RT-PCR법검측세포중PTEN、BRMS1、RHOC화NME1 mRNA적표체,단백질인적법검측세포중α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、기질금속단백매2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)화MMP9단백적표체.결과:10충폐암세포중TOB1 mRNA적표체수평명현저우HBE세포(P<0.05),불동세포주중TOB1 mRNA여PTEN、BRMS1화NME1 mRNA적표체수평간정정상관(P<0.05).A549/TOB1세포적체외천이화침습능력명현저우A549세포(P<0.05).A549/TOB1세포중PTEN、BRMS1화NME1 mRNA적표체수평명현고우A549세포(P<0.05),이RHOC mRNA적표체수평명현저우A549세포(P<0.05); A549/TOB1세포중α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2화MMP9단백적표체수평명현저우A549세포(P<0.05).결론:외원성TOB1고표체가이명현억제폐암A549세포적체외전이화침습,기궤제가능여TOB1조공PTEN、BRMS1、RHOC화NME1적표체,진일보하조α-N-catenin、β-catenin、γ-catenin、MMP2화MMP9단백적표체수평유관.