中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
10期
1884-1888
,共5页
李玉美%余德立%刘来兵%余资江
李玉美%餘德立%劉來兵%餘資江
리옥미%여덕립%류래병%여자강
丹参酮ⅡA%骨髓间充质干细胞%神经元样细胞%诱导分化%差速贴壁
丹參酮ⅡA%骨髓間充質榦細胞%神經元樣細胞%誘導分化%差速貼壁
단삼동ⅡA%골수간충질간세포%신경원양세포%유도분화%차속첩벽
背景:采用中药作为诱导剂对骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向诱导分化是否会有效果呢?目的:验证碱性成纤维细胞生长因子预诱导后加入中药丹参酮ⅡA 体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的效应.方法:采用Percoll 分离液密度梯度离心法获取骨髓间充质干细胞,取第3 代细胞利用碱性成纤维细胞生长因子联合丹参酮ⅡA 诱导其向神经元样细胞分化,全反式维甲酸无血清培养基诱导液及不进行诱导的细胞做为对照.结果与结论:①骨髓间充质干细胞能稳定表达间质细胞特异性的标记物CD44,表达阳性率为(91.00±1.58)%,但不表达CD34 、CD45,流式细胞学检测其纯度高达95.5%.②诱导分化后经扫描电镜检测可观察到典型的神经元样细胞结构;免疫组织化学检测细胞表达神经元特导性烯醇化酶,神经元特导性烯醇化酶阳性率为(75.60±2.31)%,Nestin 呈一过性表达增加后随着诱导时间延长逐渐减低至阴性,不表达神经胶质纤维酸性蛋白.说明经碱性成纤维细胞生长因子预诱导后加入丹参酮ⅡA 能高效地定向诱导神经元样细胞的分化.
揹景:採用中藥作為誘導劑對骨髓間充質榦細胞嚮神經元樣細胞定嚮誘導分化是否會有效果呢?目的:驗證堿性成纖維細胞生長因子預誘導後加入中藥丹參酮ⅡA 體外誘導骨髓間充質榦細胞嚮神經元樣細胞分化的效應.方法:採用Percoll 分離液密度梯度離心法穫取骨髓間充質榦細胞,取第3 代細胞利用堿性成纖維細胞生長因子聯閤丹參酮ⅡA 誘導其嚮神經元樣細胞分化,全反式維甲痠無血清培養基誘導液及不進行誘導的細胞做為對照.結果與結論:①骨髓間充質榦細胞能穩定錶達間質細胞特異性的標記物CD44,錶達暘性率為(91.00±1.58)%,但不錶達CD34 、CD45,流式細胞學檢測其純度高達95.5%.②誘導分化後經掃描電鏡檢測可觀察到典型的神經元樣細胞結構;免疫組織化學檢測細胞錶達神經元特導性烯醇化酶,神經元特導性烯醇化酶暘性率為(75.60±2.31)%,Nestin 呈一過性錶達增加後隨著誘導時間延長逐漸減低至陰性,不錶達神經膠質纖維痠性蛋白.說明經堿性成纖維細胞生長因子預誘導後加入丹參酮ⅡA 能高效地定嚮誘導神經元樣細胞的分化.
배경:채용중약작위유도제대골수간충질간세포향신경원양세포정향유도분화시부회유효과니?목적:험증감성성섬유세포생장인자예유도후가입중약단삼동ⅡA 체외유도골수간충질간세포향신경원양세포분화적효응.방법:채용Percoll 분리액밀도제도리심법획취골수간충질간세포,취제3 대세포이용감성성섬유세포생장인자연합단삼동ⅡA 유도기향신경원양세포분화,전반식유갑산무혈청배양기유도액급불진행유도적세포주위대조.결과여결론:①골수간충질간세포능은정표체간질세포특이성적표기물CD44,표체양성솔위(91.00±1.58)%,단불표체CD34 、CD45,류식세포학검측기순도고체95.5%.②유도분화후경소묘전경검측가관찰도전형적신경원양세포결구;면역조직화학검측세포표체신경원특도성희순화매,신경원특도성희순화매양성솔위(75.60±2.31)%,Nestin 정일과성표체증가후수착유도시간연장축점감저지음성,불표체신경효질섬유산성단백.설명경감성성섬유세포생장인자예유도후가입단삼동ⅡA 능고효지정향유도신경원양세포적분화.