厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2006年
z1期
129-133
,共5页
吴国平%郭川%刘冰心%梁银龙%苏文金%曹敏杰
吳國平%郭川%劉冰心%樑銀龍%囌文金%曹敏傑
오국평%곽천%류빙심%량은룡%소문금%조민걸
II型猪圆环病毒%ORF2%原核表达%初步应用
II型豬圓環病毒%ORF2%原覈錶達%初步應用
II형저원배병독%ORF2%원핵표체%초보응용
II型猪圆环病毒(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原.本研究用PCR以构建的PCV2 ORF2重组质粒pBS-T-ORF2为模板,扩增截短的ORF2(tORF2)基因亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒pGEX-tORF2并转化大肠杆菌BL21(DE3).经SDS-PAGE及Western blot鉴定,成功表达了谷胱甘肽S转移酶(GST)融合的tORF2,重组蛋白分子量约为45ku,表达量约为菌体总蛋白的20%,重组蛋白具有良好的免疫学活性.用tORF2重组蛋白对20份临床猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)阳性猪血清进行Western blot检测,有4份(20%)血清显示PCV2抗体阳性,说明PCV2与PRRSV存在共同感染现象.本研究初步证明表达的tORF2重组融合蛋白可以应用于临床检测.
II型豬圓環病毒(PCV2)是引起斷奶仔豬多繫統衰竭綜閤癥(PMWS)的重要病原.本研究用PCR以構建的PCV2 ORF2重組質粒pBS-T-ORF2為模闆,擴增截短的ORF2(tORF2)基因亞剋隆至錶達載體pGEX-4T-3,構建重組錶達質粒pGEX-tORF2併轉化大腸桿菌BL21(DE3).經SDS-PAGE及Western blot鑒定,成功錶達瞭穀胱甘肽S轉移酶(GST)融閤的tORF2,重組蛋白分子量約為45ku,錶達量約為菌體總蛋白的20%,重組蛋白具有良好的免疫學活性.用tORF2重組蛋白對20份臨床豬繁殖與呼吸障礙綜閤徵(PRRS)暘性豬血清進行Western blot檢測,有4份(20%)血清顯示PCV2抗體暘性,說明PCV2與PRRSV存在共同感染現象.本研究初步證明錶達的tORF2重組融閤蛋白可以應用于臨床檢測.
II형저원배병독(PCV2)시인기단내자저다계통쇠갈종합증(PMWS)적중요병원.본연구용PCR이구건적PCV2 ORF2중조질립pBS-T-ORF2위모판,확증절단적ORF2(tORF2)기인아극륭지표체재체pGEX-4T-3,구건중조표체질립pGEX-tORF2병전화대장간균BL21(DE3).경SDS-PAGE급Western blot감정,성공표체료곡광감태S전이매(GST)융합적tORF2,중조단백분자량약위45ku,표체량약위균체총단백적20%,중조단백구유량호적면역학활성.용tORF2중조단백대20빈림상저번식여호흡장애종합정(PRRS)양성저혈청진행Western blot검측,유4빈(20%)혈청현시PCV2항체양성,설명PCV2여PRRSV존재공동감염현상.본연구초보증명표체적tORF2중조융합단백가이응용우림상검측.
