中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2008年
1期
17-20
,共4页
谢书阳%王萍玉%王桂兰%白咸勇%李有杰%张公文
謝書暘%王萍玉%王桂蘭%白鹹勇%李有傑%張公文
사서양%왕평옥%왕계란%백함용%리유걸%장공문
RNA干扰%基因表达%基因沉默%基因治疗
RNA榦擾%基因錶達%基因沉默%基因治療
RNA간우%기인표체%기인침묵%기인치료
目的 研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用.方法 以PCR方法 从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的 基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi).将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的 基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况.结果 RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达.结论 RNAi技术能抑制目的 基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具.
目的 研究RNA榦擾(RNAi)對體外和體內基因錶達的沉默作用.方法 以PCR方法 從基因組DNA中剋隆齣依賴于RNA聚閤酶Ⅲ的H1啟動子,併用于驅動RNAi片段的閤成;構建特異性針對目的 基因(綠色熒光蛋白,GFP)的RNAi載體(Pi).將RNAi榦擾載體和GFP載體轉染NIH3T3細胞,應用熒光顯微鏡觀察、RT-PCR、流式細胞技術(FACS)分析上述細胞中RNAi對目的 基因GFP錶達的抑製效果,進一步在箇體水平將RNAi載體註入小鼠體內,研究RNAi對GFP錶達的抑製情況.結果 RNAi能有效地使NIH3T3細胞中GFP錶達量降低約60%以上,併能有效地抑製GFP在轉基因小鼠體內的錶達.結論 RNAi技術能抑製目的 基因在體內外的錶達,是一種有效的基因治療工具.
목적 연구RNA간우(RNAi)대체외화체내기인표체적침묵작용.방법 이PCR방법 종기인조DNA중극륭출의뢰우RNA취합매Ⅲ적H1계동자,병용우구동RNAi편단적합성;구건특이성침대목적 기인(록색형광단백,GFP)적RNAi재체(Pi).장RNAi간우재체화GFP재체전염NIH3T3세포,응용형광현미경관찰、RT-PCR、류식세포기술(FACS)분석상술세포중RNAi대목적 기인GFP표체적억제효과,진일보재개체수평장RNAi재체주입소서체내,연구RNAi대GFP표체적억제정황.결과 RNAi능유효지사NIH3T3세포중GFP표체량강저약60%이상,병능유효지억제GFP재전기인소서체내적표체.결론 RNAi기술능억제목적 기인재체내외적표체,시일충유효적기인치료공구.
