高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2011年
12期
2817-2822
,共6页
王瑞俭%郑良玉%杨雪莹%杨晔%王晓娟%曹淑桂
王瑞儉%鄭良玉%楊雪瑩%楊曄%王曉娟%曹淑桂
왕서검%정량옥%양설형%양엽%왕효연%조숙계
乙酰辅酶A羧化酶%羧基转移酶功能域%蛋白表达%相互作用%除草剂
乙酰輔酶A羧化酶%羧基轉移酶功能域%蛋白錶達%相互作用%除草劑
을선보매A최화매%최기전이매공능역%단백표체%상호작용%제초제
以中国春小麦幼苗为材料,克隆构建了小麦质体乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的羧基转移酶(CT)重组质粒( RCP18-5),并实现了重组质粒在大肠杆菌中的可溶性高表达.对重组蛋白的性质研究表明,该蛋白具有较强的疏水性,稳定性不高.为改善这种状况,对CT功能域基因进行了截短和延长,同样于大肠杆菌中进行表达.结果表明,仅长度为2325 bp的完整CT功能域基因能以可溶形式表达;2109 bp基因可表达,但是以包涵体形式存在;而1869 bp及3501 bp基因则不能表达.通过圆二色光谱及差热扫描分析对纯化的CT功能域蛋白与除草剂的相互作用进行研究表明,在除草剂存在下,CT蛋白的光谱发生显著变化,说明除草剂与可溶性蛋白之间存在较强的相互作用.
以中國春小麥幼苗為材料,剋隆構建瞭小麥質體乙酰輔酶A羧化酶(ACCase)的羧基轉移酶(CT)重組質粒( RCP18-5),併實現瞭重組質粒在大腸桿菌中的可溶性高錶達.對重組蛋白的性質研究錶明,該蛋白具有較彊的疏水性,穩定性不高.為改善這種狀況,對CT功能域基因進行瞭截短和延長,同樣于大腸桿菌中進行錶達.結果錶明,僅長度為2325 bp的完整CT功能域基因能以可溶形式錶達;2109 bp基因可錶達,但是以包涵體形式存在;而1869 bp及3501 bp基因則不能錶達.通過圓二色光譜及差熱掃描分析對純化的CT功能域蛋白與除草劑的相互作用進行研究錶明,在除草劑存在下,CT蛋白的光譜髮生顯著變化,說明除草劑與可溶性蛋白之間存在較彊的相互作用.
이중국춘소맥유묘위재료,극륭구건료소맥질체을선보매A최화매(ACCase)적최기전이매(CT)중조질립( RCP18-5),병실현료중조질립재대장간균중적가용성고표체.대중조단백적성질연구표명,해단백구유교강적소수성,은정성불고.위개선저충상황,대CT공능역기인진행료절단화연장,동양우대장간균중진행표체.결과표명,부장도위2325 bp적완정CT공능역기인능이가용형식표체;2109 bp기인가표체,단시이포함체형식존재;이1869 bp급3501 bp기인칙불능표체.통과원이색광보급차열소묘분석대순화적CT공능역단백여제초제적상호작용진행연구표명,재제초제존재하,CT단백적광보발생현저변화,설명제초제여가용성단백지간존재교강적상호작용.