新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
2期
336-340
,共5页
简子健%马素贞%申卫红%翟少华%赵森
簡子健%馬素貞%申衛紅%翟少華%趙森
간자건%마소정%신위홍%적소화%조삼
犬瘟热病毒%N蛋白基因%融合蛋白%原核表达条件的优化%纯化
犬瘟熱病毒%N蛋白基因%融閤蛋白%原覈錶達條件的優化%純化
견온열병독%N단백기인%융합단백%원핵표체조건적우화%순화
[目的]提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量.[方法]研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST - CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST - Sepharose 4B亲和层析柱对GST - CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定.[结果]大肠杆菌BL21 (DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600 =1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8h,GST - CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL.[结论]确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础.
[目的]提高犬瘟熱病毒N蛋白基因在大腸桿菌中錶達可溶性GST融閤蛋白的含量.[方法]研究誘導劑(IPTG)的最佳加入時間、誘導劑(IPTG)濃度、誘導時間以及不同溫度條件對GST - CDV N融閤蛋白錶達的影響,穫得在大腸桿菌中的最佳的錶達條件,然後再在最佳條件下大量的錶達,用GST - Sepharose 4B親和層析柱對GST - CDV N融閤蛋白進行純化,得到最大量的可溶性融閤蛋白,併對蛋白含量進行測定.[結果]大腸桿菌BL21 (DE3)轉化菌在37℃培養3.5 h(OD600 =1.314)時,加入IPTG使終濃度為1 mmol/L,然後在27℃誘導8h,GST - CDV N融閤蛋白可溶性錶達量最高,達到0.862 mg/mL.[結論]確定瞭犬瘟熱病毒N蛋白基因的優化錶達條件,為犬瘟熱病毒分子免疫學診斷和亞單位疫苗的研製奠定瞭基礎.
[목적]제고견온열병독N단백기인재대장간균중표체가용성GST융합단백적함량.[방법]연구유도제(IPTG)적최가가입시간、유도제(IPTG)농도、유도시간이급불동온도조건대GST - CDV N융합단백표체적영향,획득재대장간균중적최가적표체조건,연후재재최가조건하대량적표체,용GST - Sepharose 4B친화층석주대GST - CDV N융합단백진행순화,득도최대량적가용성융합단백,병대단백함량진행측정.[결과]대장간균BL21 (DE3)전화균재37℃배양3.5 h(OD600 =1.314)시,가입IPTG사종농도위1 mmol/L,연후재27℃유도8h,GST - CDV N융합단백가용성표체량최고,체도0.862 mg/mL.[결론]학정료견온열병독N단백기인적우화표체조건,위견온열병독분자면역학진단화아단위역묘적연제전정료기출.
