中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
23期
113-117
,共5页
双链RNA%毛蚶%RNA干扰%软体动物%基因表达
雙鏈RNA%毛蚶%RNA榦擾%軟體動物%基因錶達
쌍련RNA%모감%RNA간우%연체동물%기인표체
为了在软体动物中建立RNA干扰技术,以用于毛蚶基因功能研究.通过体外转录技术合成双链RNA,并将其注射毛蚶干扰目标基因的表达.肌肉注射双链RNA48 h后取样,用RT-PCR技术检测目标基因的表达变化,以确定干扰的有效性.结果显示:各目标基因的表达均能被各自特异的双链RNA有效干扰而降低.在注射双链RNA后不同时间点,即12、48、72、96、120 h,取样检测目标基因的时序表达,以确定目标基因表达被干扰的时间效应.发现目标基因的表达在48 h即能有效降低,而且有效时间能持续至120 h以上.对注射双链RNA的动物个体,于48 h取样检测不同组织的目标基因表达,发现毛蚶的RNA干扰效应能系统性地在不同组织发生,表明干扰效应能在不同组织之间进行传递.因此,本研究报道了一种稳定的毛蚶RNA干扰技术,为在毛蚶中进行基因功能鉴定和抗病毒研究提供了一个有效的分子生物学的方法.
為瞭在軟體動物中建立RNA榦擾技術,以用于毛蚶基因功能研究.通過體外轉錄技術閤成雙鏈RNA,併將其註射毛蚶榦擾目標基因的錶達.肌肉註射雙鏈RNA48 h後取樣,用RT-PCR技術檢測目標基因的錶達變化,以確定榦擾的有效性.結果顯示:各目標基因的錶達均能被各自特異的雙鏈RNA有效榦擾而降低.在註射雙鏈RNA後不同時間點,即12、48、72、96、120 h,取樣檢測目標基因的時序錶達,以確定目標基因錶達被榦擾的時間效應.髮現目標基因的錶達在48 h即能有效降低,而且有效時間能持續至120 h以上.對註射雙鏈RNA的動物箇體,于48 h取樣檢測不同組織的目標基因錶達,髮現毛蚶的RNA榦擾效應能繫統性地在不同組織髮生,錶明榦擾效應能在不同組織之間進行傳遞.因此,本研究報道瞭一種穩定的毛蚶RNA榦擾技術,為在毛蚶中進行基因功能鑒定和抗病毒研究提供瞭一箇有效的分子生物學的方法.
위료재연체동물중건립RNA간우기술,이용우모감기인공능연구.통과체외전록기술합성쌍련RNA,병장기주사모감간우목표기인적표체.기육주사쌍련RNA48 h후취양,용RT-PCR기술검측목표기인적표체변화,이학정간우적유효성.결과현시:각목표기인적표체균능피각자특이적쌍련RNA유효간우이강저.재주사쌍련RNA후불동시간점,즉12、48、72、96、120 h,취양검측목표기인적시서표체,이학정목표기인표체피간우적시간효응.발현목표기인적표체재48 h즉능유효강저,이차유효시간능지속지120 h이상.대주사쌍련RNA적동물개체,우48 h취양검측불동조직적목표기인표체,발현모감적RNA간우효응능계통성지재불동조직발생,표명간우효응능재불동조직지간진행전체.인차,본연구보도료일충은정적모감RNA간우기술,위재모감중진행기인공능감정화항병독연구제공료일개유효적분자생물학적방법.
