目的:研究缬草波春诱导胃癌细胞凋亡,探讨其诱导凋亡与半胱氨酸酶(Caspase)及生存素(Survivin)mRNA、P53蛋白、Survivin蛋白表达的关系.方法:以100 mg/L的缬草波春作用于加Caspase-3抑制剂、Caspase-8抑制剂、Caspase-9抑制剂和未加Caspases抑制剂培养的MKN-45细胞24,48和72 h,用流式细胞仪分别检测细胞凋亡率;不同浓度的缬草波春(5,10,25,50,100 mg/L)作用MKN-45细胞不同时间(24,48,72 h)后,用tripure提取液提取细胞RNA,用RT-PCR法,检测Survivin mRNA的表达.不同浓度缬草波春(50和100 mg/L)作用MKN-45胃癌细胞株24 h后,用免疫组化的方法,检测P53蛋白和Survivin蛋白的表达.结果:单用Caspase抑制剂组,作用24,48和72 h对MKN-45细胞凋亡率无明显影响,与对照组比较差异无显著意义.Caspase-3抑制剂、Caspase-9抑制剂与缬草波春联合应用后24,48和72 h使MKN-45细胞凋亡率高于对照组(24 h:5.73%,5.41% vs 4.38%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 4.35%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 4.54%,P＜0.01),低于缬草波春组(24 h:5.73%,5.41% vs 8.14%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 12.31%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 26.41%,P＜0.01),与对照组及缬草波春组比较差异均有显著意义(P＜0.01).Caspase-8抑制剂与缬草波春联合应用后24,48和72 h MKN-45细胞凋亡率明显增加,与对照组比较差异有显著意义(8.02% vs 4.38%,P＜0.01;11.05% vs 4.35%,P＜0.01;24.86% vs 4.54%,P＜0.01),与单用缬草波春组比较差异无显著意义.缬草波春降低MKN-45胃癌细胞株Survivin mRNA的表达,并有浓度依赖性和时间依赖性,而且使MKN-45胃癌细胞株P53蛋白表达增加,Survivin蛋白表达降低,均有浓度依赖性.结论:缬草波春可诱导MKN-45细胞凋亡,其作用可部分被Caspase-3,Caspase-9抑制剂所抑制,但不能被Caspase-8抑制剂所抑制.缬草波春诱导MKN-45胃癌细胞株凋亡与P53蛋白表达提高及Survivin mRNA和Survivin蛋白低表达降低有关.
目的:研究纈草波春誘導胃癌細胞凋亡,探討其誘導凋亡與半胱氨痠酶(Caspase)及生存素(Survivin)mRNA、P53蛋白、Survivin蛋白錶達的關繫.方法:以100 mg/L的纈草波春作用于加Caspase-3抑製劑、Caspase-8抑製劑、Caspase-9抑製劑和未加Caspases抑製劑培養的MKN-45細胞24,48和72 h,用流式細胞儀分彆檢測細胞凋亡率;不同濃度的纈草波春(5,10,25,50,100 mg/L)作用MKN-45細胞不同時間(24,48,72 h)後,用tripure提取液提取細胞RNA,用RT-PCR法,檢測Survivin mRNA的錶達.不同濃度纈草波春(50和100 mg/L)作用MKN-45胃癌細胞株24 h後,用免疫組化的方法,檢測P53蛋白和Survivin蛋白的錶達.結果:單用Caspase抑製劑組,作用24,48和72 h對MKN-45細胞凋亡率無明顯影響,與對照組比較差異無顯著意義.Caspase-3抑製劑、Caspase-9抑製劑與纈草波春聯閤應用後24,48和72 h使MKN-45細胞凋亡率高于對照組(24 h:5.73%,5.41% vs 4.38%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 4.35%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 4.54%,P＜0.01),低于纈草波春組(24 h:5.73%,5.41% vs 8.14%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 12.31%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 26.41%,P＜0.01),與對照組及纈草波春組比較差異均有顯著意義(P＜0.01).Caspase-8抑製劑與纈草波春聯閤應用後24,48和72 h MKN-45細胞凋亡率明顯增加,與對照組比較差異有顯著意義(8.02% vs 4.38%,P＜0.01;11.05% vs 4.35%,P＜0.01;24.86% vs 4.54%,P＜0.01),與單用纈草波春組比較差異無顯著意義.纈草波春降低MKN-45胃癌細胞株Survivin mRNA的錶達,併有濃度依賴性和時間依賴性,而且使MKN-45胃癌細胞株P53蛋白錶達增加,Survivin蛋白錶達降低,均有濃度依賴性.結論:纈草波春可誘導MKN-45細胞凋亡,其作用可部分被Caspase-3,Caspase-9抑製劑所抑製,但不能被Caspase-8抑製劑所抑製.纈草波春誘導MKN-45胃癌細胞株凋亡與P53蛋白錶達提高及Survivin mRNA和Survivin蛋白低錶達降低有關.
목적:연구힐초파춘유도위암세포조망,탐토기유도조망여반광안산매(Caspase)급생존소(Survivin)mRNA、P53단백、Survivin단백표체적관계.방법:이100 mg/L적힐초파춘작용우가Caspase-3억제제、Caspase-8억제제、Caspase-9억제제화미가Caspases억제제배양적MKN-45세포24,48화72 h,용류식세포의분별검측세포조망솔;불동농도적힐초파춘(5,10,25,50,100 mg/L)작용MKN-45세포불동시간(24,48,72 h)후,용tripure제취액제취세포RNA,용RT-PCR법,검측Survivin mRNA적표체.불동농도힐초파춘(50화100 mg/L)작용MKN-45위암세포주24 h후,용면역조화적방법,검측P53단백화Survivin단백적표체.결과:단용Caspase억제제조,작용24,48화72 h대MKN-45세포조망솔무명현영향,여대조조비교차이무현저의의.Caspase-3억제제、Caspase-9억제제여힐초파춘연합응용후24,48화72 h사MKN-45세포조망솔고우대조조(24 h:5.73%,5.41% vs 4.38%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 4.35%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 4.54%,P＜0.01),저우힐초파춘조(24 h:5.73%,5.41% vs 8.14%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 12.31%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 26.41%,P＜0.01),여대조조급힐초파춘조비교차이균유현저의의(P＜0.01).Caspase-8억제제여힐초파춘연합응용후24,48화72 h MKN-45세포조망솔명현증가,여대조조비교차이유현저의의(8.02% vs 4.38%,P＜0.01;11.05% vs 4.35%,P＜0.01;24.86% vs 4.54%,P＜0.01),여단용힐초파춘조비교차이무현저의의.힐초파춘강저MKN-45위암세포주Survivin mRNA적표체,병유농도의뢰성화시간의뢰성,이차사MKN-45위암세포주P53단백표체증가,Survivin단백표체강저,균유농도의뢰성.결론:힐초파춘가유도MKN-45세포조망,기작용가부분피Caspase-3,Caspase-9억제제소억제,단불능피Caspase-8억제제소억제.힐초파춘유도MKN-45위암세포주조망여P53단백표체제고급Survivin mRNA화Survivin단백저표체강저유관.
