重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
3期
232-235
,共4页
Endoglin%噬菌体随机肽库%结合肽%筛选
Endoglin%噬菌體隨機肽庫%結閤肽%篩選
Endoglin%서균체수궤태고%결합태%사선
目的:对噬菌体随机12肽库进行筛选,寻求可与Endoglin结合的小分子短肽并测定其亲和常数.方法:经过3轮"吸附-洗脱-扩增"后,随机挑取16个克隆,双夹心ELISA法鉴定其亲和性,测定阳性克隆的DNA序列,竞争抑制实验检测优势克隆的特异性,非竞争法ELISA固相法计算阳性噬菌体融合肽的亲和常数.结果:三轮生物筛选,噬菌体得到有效富集,竞争性ELISA显示6个阳性噬菌体克隆与rhEndoglin有较强的结合活性,测序获得5种多肽序列,优势序列为:AHKHVHHVPVRL,竞争抑制实验显示阳性噬菌体克隆与Endoglin有良好的亲和性,其亲和常数为:(1.431±0.293)×107 mol/L.结论:利用噬菌体肽库技术可以获得亲和力较强的Endoglin的结合肽,为今后进一步研究Endoglin在卵巢癌的早期诊断方面的作用奠定基础.
目的:對噬菌體隨機12肽庫進行篩選,尋求可與Endoglin結閤的小分子短肽併測定其親和常數.方法:經過3輪"吸附-洗脫-擴增"後,隨機挑取16箇剋隆,雙夾心ELISA法鑒定其親和性,測定暘性剋隆的DNA序列,競爭抑製實驗檢測優勢剋隆的特異性,非競爭法ELISA固相法計算暘性噬菌體融閤肽的親和常數.結果:三輪生物篩選,噬菌體得到有效富集,競爭性ELISA顯示6箇暘性噬菌體剋隆與rhEndoglin有較彊的結閤活性,測序穫得5種多肽序列,優勢序列為:AHKHVHHVPVRL,競爭抑製實驗顯示暘性噬菌體剋隆與Endoglin有良好的親和性,其親和常數為:(1.431±0.293)×107 mol/L.結論:利用噬菌體肽庫技術可以穫得親和力較彊的Endoglin的結閤肽,為今後進一步研究Endoglin在卵巢癌的早期診斷方麵的作用奠定基礎.
목적:대서균체수궤12태고진행사선,심구가여Endoglin결합적소분자단태병측정기친화상수.방법:경과3륜"흡부-세탈-확증"후,수궤도취16개극륭,쌍협심ELISA법감정기친화성,측정양성극륭적DNA서렬,경쟁억제실험검측우세극륭적특이성,비경쟁법ELISA고상법계산양성서균체융합태적친화상수.결과:삼륜생물사선,서균체득도유효부집,경쟁성ELISA현시6개양성서균체극륭여rhEndoglin유교강적결합활성,측서획득5충다태서렬,우세서렬위:AHKHVHHVPVRL,경쟁억제실험현시양성서균체극륭여Endoglin유량호적친화성,기친화상수위:(1.431±0.293)×107 mol/L.결론:이용서균체태고기술가이획득친화력교강적Endoglin적결합태,위금후진일보연구Endoglin재란소암적조기진단방면적작용전정기출.
