中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
5期
327-331
,共5页
卢军%胡传伟%金乔%彭大新%刘文博%高崧%张如宽%刘秀梵
盧軍%鬍傳偉%金喬%彭大新%劉文博%高崧%張如寬%劉秀梵
로군%호전위%금교%팽대신%류문박%고숭%장여관%류수범
鸡马立克氏病%重组鸡痘病毒%gB基因%遗传稳定性%生物安全性
鷄馬立剋氏病%重組鷄痘病毒%gB基因%遺傳穩定性%生物安全性
계마립극씨병%중조계두병독%gB기인%유전은정성%생물안전성
为了评价表达鸡马立克氏病病毒gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的遗传稳定性,我们将纯化后的重组病毒在CEF单层上连续传30代,引起细胞病变的速度和形态均未发生明显变化;覆盖含X-Gal的琼脂引起的空斑均为蓝色;间接免疫荧光实验证明rFPV-gB/R中的gB基因始终能稳定表达;序列测定结果表明,重组病毒在细胞上连续传30代、在SPF鸡上连续传5代后,gB基因序列没有发生任何变化;以0、10、20、30代重组病毒制成冻干疫苗进行的实验室免疫效力实验表明,细胞连续传代后rFPV-gB/R仍然保持了原有的免疫原性.可见重组鸡痘病毒gB基因的结构和免疫原性都是高度稳定的.为了评价rFPV-gB/R的生物安全性,我们将rFPV-gB/R通过SPF鸡连续传5代,检测病毒在鸡体的存在部位及其消长、生长繁殖性能和毒力变化;将rFPV-gB/R免疫鸡与未免疫鸡同笼饲养,攻击FPV-102E6强毒,以检测rFPV-gB/R感染鸡的接触传染性.结果显示,rFPV-gB/R在鸡体的存在时间大约为7 d,在体内仅存在于接种部位;鸡体传代后痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因核苷酸序列未发生任何变化;同居未免疫SPF鸡在痘病毒强毒攻击后全部发痘,可见重组病毒免疫鸡没有接触传染性,能在鸡体内稳定地传代,rFPV-gB/R具有高度的生物安全性.
為瞭評價錶達鷄馬立剋氏病病毒gB基因重組鷄痘病毒(rFPV-gB/R)的遺傳穩定性,我們將純化後的重組病毒在CEF單層上連續傳30代,引起細胞病變的速度和形態均未髮生明顯變化;覆蓋含X-Gal的瓊脂引起的空斑均為藍色;間接免疫熒光實驗證明rFPV-gB/R中的gB基因始終能穩定錶達;序列測定結果錶明,重組病毒在細胞上連續傳30代、在SPF鷄上連續傳5代後,gB基因序列沒有髮生任何變化;以0、10、20、30代重組病毒製成凍榦疫苗進行的實驗室免疫效力實驗錶明,細胞連續傳代後rFPV-gB/R仍然保持瞭原有的免疫原性.可見重組鷄痘病毒gB基因的結構和免疫原性都是高度穩定的.為瞭評價rFPV-gB/R的生物安全性,我們將rFPV-gB/R通過SPF鷄連續傳5代,檢測病毒在鷄體的存在部位及其消長、生長繁殖性能和毒力變化;將rFPV-gB/R免疫鷄與未免疫鷄同籠飼養,攻擊FPV-102E6彊毒,以檢測rFPV-gB/R感染鷄的接觸傳染性.結果顯示,rFPV-gB/R在鷄體的存在時間大約為7 d,在體內僅存在于接種部位;鷄體傳代後痘病毒毒力有一定程度下降,gB基因覈苷痠序列未髮生任何變化;同居未免疫SPF鷄在痘病毒彊毒攻擊後全部髮痘,可見重組病毒免疫鷄沒有接觸傳染性,能在鷄體內穩定地傳代,rFPV-gB/R具有高度的生物安全性.
위료평개표체계마립극씨병병독gB기인중조계두병독(rFPV-gB/R)적유전은정성,아문장순화후적중조병독재CEF단층상련속전30대,인기세포병변적속도화형태균미발생명현변화;복개함X-Gal적경지인기적공반균위람색;간접면역형광실험증명rFPV-gB/R중적gB기인시종능은정표체;서렬측정결과표명,중조병독재세포상련속전30대、재SPF계상련속전5대후,gB기인서렬몰유발생임하변화;이0、10、20、30대중조병독제성동간역묘진행적실험실면역효력실험표명,세포련속전대후rFPV-gB/R잉연보지료원유적면역원성.가견중조계두병독gB기인적결구화면역원성도시고도은정적.위료평개rFPV-gB/R적생물안전성,아문장rFPV-gB/R통과SPF계련속전5대,검측병독재계체적존재부위급기소장、생장번식성능화독력변화;장rFPV-gB/R면역계여미면역계동롱사양,공격FPV-102E6강독,이검측rFPV-gB/R감염계적접촉전염성.결과현시,rFPV-gB/R재계체적존재시간대약위7 d,재체내부존재우접충부위;계체전대후두병독독력유일정정도하강,gB기인핵감산서렬미발생임하변화;동거미면역SPF계재두병독강독공격후전부발두,가견중조병독면역계몰유접촉전염성,능재계체내은정지전대,rFPV-gB/R구유고도적생물안전성.
